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cpuyao

木虫 (小有名气)

[求助] 色谱柱用过一段时间峰分叉怎么办

我用的柱子是Agilent Extend 1.8u 50 mm的柱子,流动相是乙腈和0.05%的二乙胺水,用过一段时间发下峰是分叉的,我的样品中含有蛋白,但是柱子前带了预柱,是5u的,不知道原因是什么,谁能帮忙一下,还有这样怎么处理能挽救我的柱子。谢谢了
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sdwyz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cpuyao: 金币+10, 有帮助 2013-05-26 13:08:40
峰分叉(裂峰)与色谱柱相关的原因:
  色谱柱污染         清洗或更换色谱柱  
  柱前滤片污染      反冲色谱柱  或更换进样口过滤片  
  色谱柱出现间断   更换色谱柱或填充空隙  
  保护柱失效         更换保护柱  
  样品分布差          改进色谱柱进样口的设计
  与色谱柱无关的原因:柱外体积过大、样品过量、流动相组分(添加剂、pH值、缓冲浓度)改变。
6楼2013-05-26 10:29:49
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笑盲虫

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cpuyao: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-05-26 13:09:13
应当是柱头塌陷,形成了二次进样,因为你用的是二乙胺也不知道你的ph是多少
extend使用说明:PH值2~11.5端基封尾技术, 改善了碱性化合物的保留、分离度及峰形
用文字走路,用行动分析
2楼2013-05-24 08:42:19
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cpuyao

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 笑盲虫 at 2013-05-24 08:42:19
应当是柱头塌陷,形成了二次进样,因为你用的是二乙胺也不知道你的ph是多少
extend使用说明:PH值2~11.5端基封尾技术, 改善了碱性化合物的保留、分离度及峰形

谢谢,我的二乙胺ph=10左右,应该能符合要求吧。这个条件也没有用多久啊
3楼2013-05-24 13:31:31
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笑盲虫

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
cpuyao: 金币+5 2013-05-25 15:26:31
会不会是蛋白沉积在了筛板的地方,反正肯定是柱子的问题,而且是在筛板部分引起的
你不是说用了一段时间后  你的样品处理干净了没有
用文字走路,用行动分析
4楼2013-05-24 13:37:28
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