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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相梯度洗脱压力不稳，最终将为0
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tradaisy

铜虫 (初入文坛)

[求助] 液相梯度洗脱压力不稳，最终将为0

洗脱程序：
时间（分钟）        流动相A（%）        流动相B（%）        洗脱
0-10                           68.5                                31.5                        等度
10-22                       68.5→52.5        31.5→47.5        线性梯度
22-30                            52.5                                 47.5        等度
30-40                          52.5→26        47.5→74                       线性梯度
40-50                              26                                  74                         等度
流动相A相：磷酸二氢铵约5.75g，溶解于1000mL超纯水中，混匀，用磷酸调节pH到3.5，用0.45μm水系滤膜过滤，取上述溶液与乙腈按19:1比例混合，摇匀，脱气；
流动相B相：乙腈；
每次检样时，随着序列的进行，刚开始压力正常，但是走着走着压力就掉下来了，而且每次都是运行到48min左右时，压力就出现波动，然后在后运行中压力降为0了
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天助自助者
1楼 2013-05-15 20:49:08
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笑盲虫

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来！ 2013-05-15 22:04:28
乙腈水体系在75左右时，粘度最大，这个时候溶剂的压缩因子会出现突变，尤其在加入缓冲盐的体系中，表现更为明显，所以会造成压力上下波动，另外不知道你后运行是什么条件，后运行的过程中流动相比例又要回归到开始进样的条件下，此时体系由高有机相向高缓冲盐体系过渡，会使得主动阀阀芯有较大的磨损，暂停工作，所以压力会为0.
建议流动相使用前好好脱气，有条件的话，对于二元泵体系最好加上脱气机，效果会好一些。
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用文字走路，用行动分析
2楼2013-05-15 21:25:04
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yan1984

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
因为乙腈比例高了以后磷酸二氢铵的溶解度不好会析出，所以导致压力波动厉害最后降为0，我也碰到过这个问题。建议更改条件，如果不能更改，建议结束后用约60度的水进行冲洗。
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3楼2013-05-16 11:29:18
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swallow13

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
4楼2013-05-16 12:33:58
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j115090587

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
后运行压力为零，是长时间这样吗？还是瞬间？我们这边也经常有这样类似的梯度，没出现过因为盐析，而压力为零！
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5楼2013-05-17 08:21:56
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alice81189

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

磷酸盐在乙腈中大部分都是微溶的，最后的乙腈这么高的浓度，缓冲盐很有可能会析出哦，但是我只试过会堵柱子然后压力飙升，至于压力掉为零的话，难道是泵被析出的盐磨损了然后就停了？
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6楼2013-05-31 17:21:40
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

用的是什么型号仪器

磷酸盐浓度确实大了些，如果非要这么浓，建议用有机胺
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
7楼2013-06-01 10:26:03
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 笑盲虫 at 2013-05-15 21:25:04
乙腈水体系在75左右时，粘度最大，这个时候溶剂的压缩因子会出现突变，尤其在加入缓冲盐的体系中，表现更为明显，所以会造成压力上下波动，另外不知道你后运行是什么条件，后运行的过程中流动相比例又要回归到开始进 ...

乙腈水体系在乙腈比例为20左右时黏度最大。
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悲催的研发！
8楼2013-06-03 15:26:54
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

有可能是你盐浓度过高，有机相比例提高时盐析出造成单向阀不能正常工作。另外安捷伦的四元泵的话，多通道梯度洗脱阀下面两根管路走水相，上面两管路走有机相
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悲催的研发！
9楼2013-06-03 15:29:30
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