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hello青果

银虫 (小有名气)

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[求助] 跪求：蛋白质电泳条带老是跑不开去怎么办

本科毕业论文跑蛋白质电泳，跑了几次蛋白质条带都聚在前面，溶液又重新配的也还是不行，别同学用我们的溶液条带都跑开了，但我们还是不行，胶浓度应该没问题，我们用的12%的分离胶，5%的浓缩胶，这个胶浓度下别同学的marker都是分散的，我们的就不行，我们用了12mA和20mA的电流，长的时候跑了近三个小时溴酚蓝都跑过了还不行，难道我们的操作有问题，但实在不知道错在哪里有经验的师哥师姐指一条明路，小妹先在这谢谢了

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1楼 2013-05-08 22:56:32

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DBWJ

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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hello青果(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-10 13:05:04
1949stone: MolEPI+1, good 2013-05-10 16:10:56
hello青果: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-05-11 18:27:07

首先检查一下所用试剂是否配置正确，如丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的比例，一般都是29:1的40%储液体；分离胶Tris-HCl的pH值是否是8.8，一般浓度为1.5M；AP、SDS、TEMED是否新鲜。
然后是仪器是否能提供稳定的电流/电压，参数方面是否设置有错误，例如你要12mA，其他两个值电压和功率是不是调成了固定值，我用的时候是用哪个值哪个值就固定，其他两个值调到最大。

建议你看下你同学的实验方法，和自己的比较一下看有什么不同，然后看看是不是自己的问题。