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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 跪求：蛋白质电泳条带老是跑不开去怎么办
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hello青果

银虫 (小有名气)

[求助] 跪求：蛋白质电泳条带老是跑不开去怎么办

本科毕业论文跑蛋白质电泳，跑了几次蛋白质条带都聚在前面，溶液又重新配的也还是不行，别同学用我们的溶液条带都跑开了，但我们还是不行，胶浓度应该没问题，我们用的12%的分离胶，5%的浓缩胶，这个胶浓度下别同学的marker都是分散的，我们的就不行，我们用了12mA和20mA的电流，长的时候跑了近三个小时溴酚蓝都跑过了还不行，难道我们的操作有问题，但实在不知道错在哪里有经验的师哥师姐指一条明路，小妹先在这谢谢了

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1楼 2013-05-08 22:56:32
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-05-09 08:17:12
如LS所说，检查一下acrylamide浓度和缓冲液pH。跑胶时有没有漏电？
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3楼2013-05-09 01:30:54
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hello青果(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-05-09 08:17:00
楼主你在用溴酚蓝染胶的时候一定有碰到胶吧, 对于12%的胶来说, 韧性是很好的, 你捏住一个角可以把它提起来的(甚至还可以轻轻地左右晃动). 如果楼主发现它软得不行好像轻轻一捏就烂掉的话问题就是在胶上面. 楼主的跑胶缓冲液看上去没问题, 建议换一瓶acrylamide.
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2楼2013-05-08 23:53:01
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hello青果(myprayer代发): 金币+1, 鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-05-09 08:17:42
我觉得是acrylamide浓度或者是acrylamide与bisacrylamide的比例有问题。
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4楼2013-05-09 02:19:40
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hello青果

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-05-08 23:53:01
楼主你在用溴酚蓝染胶的时候一定有碰到胶吧, 对于12%的胶来说, 韧性是很好的, 你捏住一个角可以把它提起来的(甚至还可以轻轻地左右晃动). 如果楼主发现它软得不行好像轻轻一捏就烂掉的话问题就是在胶上面. 楼主的跑 ...

我们的丙烯酰胺是重新配的，别的同学也用过了，他们能跑开啊
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5楼2013-05-09 09:06:16
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