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jc135

银虫 (初入文坛)

[求助] DNA提取问题

最近一直在提DNA,采用的是鲤鱼的干的尾鳍,上海捷瑞的试剂盒提的,电泳老是没有条带,不知怎么回事,很是郁闷,特求助!
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jc135(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-03 18:14:07
总DNA需要μg级才能用电泳检测,你确定上样量够吗?此外,提DNA的目的是什么?用做PCR模板还是做杂交?
2楼2013-05-03 11:24:49
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hyl860121

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jc135(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-03 18:14:20
提取的DNA测定过浓度吗?DNA提取质量如何呢?
3楼2013-05-03 13:35:12
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liu131412y

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-03 18:15:00
看你dna提取的方法,配制的提取液的PH是否正确,点样时最好要垂直点样,电压可以先大点将样孔中的点样压出来,再以较小的电压
4楼2013-05-03 16:10:45
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意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-03 18:15:05
你提取鱼的DNA可是用血液提取比较好提取
5楼2013-05-03 16:31:10
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jc135

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-03 11:24:49
总DNA需要μg级才能用电泳检测,你确定上样量够吗?此外,提DNA的目的是什么?用做PCR模板还是做杂交?

我提的DNA是用来做PCR的,电泳上样量为6微升,之前的几个样也是这么做的,能看到较清晰的条带,但最近的不知是不是样品降解严重。
6楼2013-05-04 10:14:46
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


jc135(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-05 17:38:32
引用回帖:
6楼: Originally posted by jc135 at 2013-05-04 10:14:46
我提的DNA是用来做PCR的,电泳上样量为6微升,之前的几个样也是这么做的,能看到较清晰的条带,但最近的不知是不是样品降解严重。...

如果你确定提DNA的步骤和试剂没有问题,试试直接用它PCR。电泳看不到可能是量的问题。
7楼2013-05-05 01:59:01
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andywang6137

木虫 (著名写手)

提取的DNA直接电泳还是PCR之后电泳?
8楼2013-05-05 11:07:34
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可乐汀

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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我做的都是先PCR再电泳的,一般看到清晰的条带再测序~另外干的尾鳍是不是角质比较厚?建议第一步水浴的时候时间长一些~~太短的话DNA不一定出的来~~
9楼2013-05-06 10:12:48
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jc135

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by andywang6137 at 2013-05-05 11:07:34
提取的DNA直接电泳还是PCR之后电泳?

直接电泳
10楼2013-05-07 09:03:08
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