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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA提取问题
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jc135

银虫 (初入文坛)

[求助] DNA提取问题

最近一直在提DNA，采用的是鲤鱼的干的尾鳍，上海捷瑞的试剂盒提的，电泳老是没有条带，不知怎么回事，很是郁闷，特求助！
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1楼 2013-05-03 10:30:47
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jc135(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-03 18:14:07
总DNA需要μg级才能用电泳检测，你确定上样量够吗？此外，提DNA的目的是什么？用做PCR模板还是做杂交？
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2楼2013-05-03 11:24:49
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hyl860121

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jc135(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-03 18:14:20
提取的DNA测定过浓度吗？DNA提取质量如何呢？
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3楼2013-05-03 13:35:12
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liu131412y

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-03 18:15:00
看你dna提取的方法，配制的提取液的PH是否正确，点样时最好要垂直点样，电压可以先大点将样孔中的点样压出来，再以较小的电压
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4楼2013-05-03 16:10:45
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意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-03 18:15:05
你提取鱼的DNA可是用血液提取比较好提取
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5楼2013-05-03 16:31:10
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jc135

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-03 11:24:49
总DNA需要μg级才能用电泳检测，你确定上样量够吗？此外，提DNA的目的是什么？用做PCR模板还是做杂交？

我提的DNA是用来做PCR的，电泳上样量为6微升，之前的几个样也是这么做的，能看到较清晰的条带，但最近的不知是不是样品降解严重。
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6楼2013-05-04 10:14:46
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
jc135(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-05 17:38:32
引用回帖:
6楼: Originally posted by jc135 at 2013-05-04 10:14:46
我提的DNA是用来做PCR的，电泳上样量为6微升，之前的几个样也是这么做的，能看到较清晰的条带，但最近的不知是不是样品降解严重。...

如果你确定提DNA的步骤和试剂没有问题，试试直接用它PCR。电泳看不到可能是量的问题。
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7楼2013-05-05 01:59:01
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andywang6137

木虫 (著名写手)
提取的DNA直接电泳还是PCR之后电泳？
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8楼2013-05-05 11:07:34
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可乐汀

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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我做的都是先PCR再电泳的，一般看到清晰的条带再测序~另外干的尾鳍是不是角质比较厚？建议第一步水浴的时候时间长一些~~太短的话DNA不一定出的来~~
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9楼2013-05-06 10:12:48
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jc135

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by andywang6137 at 2013-05-05 11:07:34
提取的DNA直接电泳还是PCR之后电泳？

直接电泳
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10楼2013-05-07 09:03:08
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