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smallhorse88

新虫 (小有名气)

[求助] 96孔板,用酶标仪测细菌生长曲线 已有2人参与

最近要用纳米材料的抗菌性,准备通过96孔板,用酶标仪测定抑制生长去点,每隔两小时测一次,以前人工取样测,太麻烦了,我想确定一下,一开始菌浓度要控制在多少?以及加样量?我要测24小时,会不会到最后菌很多,超出酶标仪范围,得不到曲线呢? 望各位好心人指导一下下》。。
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smallhorse88

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-04-17 19:14:28
只要没有污染就可以的...

那加入量怎么确定呢,药液,和菌液一般怎么加啊?
7楼2013-04-18 09:54:20
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carrieskl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking: 回帖置顶 2013-04-26 21:30:06
amisking: 金币+5, MicEPI+1, 应助指数+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-04-26 21:30:15
你是想在96孔板里培养然后到时间直接测吗?我觉得不大靠谱诶。。
培养24小时,100ul的培养基很可能不够。。
有的菌容易形成生物被膜,生物被膜在板底,测OD时会影响。。。
还有菌的量可能也会对耐药有影响,比如10^6和10^4比,也许6次方的菌量大,会抱团生长,中间的菌就保护下来了,而4次方的也许就抱不成团。。。
还有就是,酶标仪测OD值只能反映菌的总数变化,活的死的都算在里面,你是只要菌总数吗?
只是我的疑问,不确定。。
争做医生中最好的厨子
13楼2013-04-25 23:24:26
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普通回帖

莹莹陀zws

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-04-16 19:41:43
一般开始菌液浓度控制在10的4次方到5次方之间,不会的额,放心吧,再大仪器也读的出来。
悲伤着你的悲伤,幸福着你的幸福
2楼2013-04-16 16:52:14
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smallhorse88

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-04-16 16:52:14
一般开始菌液浓度控制在10的4次方到5次方之间,不会的额,放心吧,再大仪器也读的出来。

那菌有要求么,比如是刚活化的,我的菌已经培养两天了,还能直接用来测?
3楼2013-04-16 18:35:55
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莹莹陀zws

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by smallhorse88 at 2013-04-16 18:35:55
那菌有要求么,比如是刚活化的,我的菌已经培养两天了,还能直接用来测?...

只要没有污染就可以的
悲伤着你的悲伤,幸福着你的幸福
4楼2013-04-17 19:14:28
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example

新虫 (小有名气)


zhangxingc: 金币+1, 欢迎常到微生物版 2013-04-18 09:02:51
引用回帖:
2楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-04-16 16:52:14
一般开始菌液浓度控制在10的4次方到5次方之间,不会的额,放心吧,再大仪器也读的出来。

您好,我想请教MTT法测生长曲线您做过吗?我现在有荧光测度仪和荧光免疫分析仪两者都说可以测活菌数,,但是有问过一个工程师说是用应该免疫分析仪,,但是我现在荧光测读仪方便,,,请问有没有相关的经验呢
5楼2013-04-17 22:02:25
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smallhorse88

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by example at 2013-04-17 22:02:25
您好,我想请教MTT法测生长曲线您做过吗?我现在有荧光测度仪和荧光免疫分析仪两者都说可以测活菌数,,但是有问过一个工程师说是用应该免疫分析仪,,但是我现在荧光测读仪方便,,,请问有没有相关的经验呢...

不好意思,我没有做过呢》。
6楼2013-04-18 09:53:48
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莹莹陀zws

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by example at 2013-04-17 22:02:25
您好,我想请教MTT法测生长曲线您做过吗?我现在有荧光测度仪和荧光免疫分析仪两者都说可以测活菌数,,但是有问过一个工程师说是用应该免疫分析仪,,但是我现在荧光测读仪方便,,,请问有没有相关的经验呢...

不好意思,活菌没有做过
悲伤着你的悲伤,幸福着你的幸福
8楼2013-04-18 18:37:35
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莹莹陀zws

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by smallhorse88 at 2013-04-18 09:54:20
那加入量怎么确定呢,药液,和菌液一般怎么加啊?...

先调菌液,药液加入量按照最终浓度算,你自己都不确定加多少吗
悲伤着你的悲伤,幸福着你的幸福
9楼2013-04-18 18:38:55
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smallhorse88

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-04-18 18:38:55
先调菌液,药液加入量按照最终浓度算,你自己都不确定加多少吗...

我一般是先把菌稀释到我需要的浓度,比如10的六次方,在96孔板里面按照二倍稀释法稀释我的药液,第一孔是200ul原液,2以后是逐渐稀释的,然后每孔加100ul稀释好的菌液,这样的话不是药液又被稀释了么,菌液稀释了么,我这样做生长抑制曲线对不对啊...
10楼2013-04-19 08:53:56
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