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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 96孔板，用酶标仪测细菌生长曲线
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莹莹陀zws

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by smallhorse88 at 2013-04-19 08:53:56
我一般是先把菌稀释到我需要的浓度，比如10的六次方，在96孔板里面按照二倍稀释法稀释我的药液，第一孔是200ul原液，2以后是逐渐稀释的，然后每孔加100ul稀释好的菌液，这样的话不是药液又被稀释了么，菌液稀释了么 ...

你可以这样做，先把菌液在96孔板加好，再加你的药液。每孔加200ul菌液，然后按照二倍稀释法去加药液
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悲伤着你的悲伤，幸福着你的幸福
11楼2013-04-19 19:05:54
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smallhorse88

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-04-18 18:38:55
先调菌液，药液加入量按照最终浓度算，你自己都不确定加多少吗...

我现在做的时候吧，先把药液稀释到需要的浓度，然后把菌液稀释，再分别取100uL加到孔板里面，这样的话，对于菌来讲，是不是培养基太少了，会不会营养不够，对结果造成影响啊...
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12楼2013-04-25 21:25:42
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carrieskl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking: 回帖置顶 2013-04-26 21:30:06
amisking: 金币+5, MicEPI+1, 应助指数+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-04-26 21:30:15
你是想在96孔板里培养然后到时间直接测吗？我觉得不大靠谱诶。。
培养24小时，100ul的培养基很可能不够。。
有的菌容易形成生物被膜，生物被膜在板底，测OD时会影响。。。
还有菌的量可能也会对耐药有影响，比如10^6和10^4比，也许6次方的菌量大，会抱团生长，中间的菌就保护下来了，而4次方的也许就抱不成团。。。
还有就是，酶标仪测OD值只能反映菌的总数变化，活的死的都算在里面，你是只要菌总数吗？
只是我的疑问，不确定。。
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争做医生中最好的厨子
13楼2013-04-25 23:24:26
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carrieskl

木虫 (著名写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-04-19 19:05:54
你可以这样做，先把菌液在96孔板加好，再加你的药液。每孔加200ul菌液，然后按照二倍稀释法去加药液...

96孔板每孔容积一般在250-300ul左右，加液体顶多加到200ul不然很容易污染啊，摇匀时也容易洒。。。你说加200ul菌液再加药液就盛不下了。
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争做医生中最好的厨子
14楼2013-04-26 00:01:39
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smallhorse88

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by carrieskl at 2013-04-25 23:24:26
你是想在96孔板里培养然后到时间直接测吗？我觉得不大靠谱诶。。
培养24小时，100ul的培养基很可能不够。。
有的菌容易形成生物被膜，生物被膜在板底，测OD时会影响。。。
还有菌的量可能也会对耐药有影响，比如 ...

是呀，我们使用酶标仪直接测的呢...我就是不知道这样做行不行呢
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15楼2013-04-26 16:42:18
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carrieskl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by smallhorse88 at 2013-04-26 16:42:18
是呀，我们使用酶标仪直接测的呢...我就是不知道这样做行不行呢...

还是要在管里培养再每个时刻取样测OD
就是把菌液接种到培养基里（比如100ml）加药 然后摇匀分装很多管 每个时间点拿出一管测OD值
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争做医生中最好的厨子
16楼2013-04-26 17:00:36
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1935077860

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

96孔板应该每孔加菌量一定的，我做MIC时候都是一致才有意义啊
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17楼2015-07-07 22:46:17
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佳～佳

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主  你的实验做出来了吗   最近我在做相似的  请教一下   研一的虫子
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18楼2016-03-29 18:09:56
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卡卡罗特zxg

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by smallhorse88 at 2013-04-19 08:53:56
我一般是先把菌稀释到我需要的浓度，比如10的六次方，在96孔板里面按照二倍稀释法稀释我的药液，第一孔是200ul原液，2以后是逐渐稀释的，然后每孔加100ul稀释好的菌液，这样的话不是药液又被稀释了么，菌液稀释了么 ...

拿出来测od值不是会染菌吗？那怎么继续培养啊？
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19楼2017-07-19 16:45:14
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