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smallhorse88

新虫 (小有名气)

[求助] 96孔板,用酶标仪测细菌生长曲线已有2人参与

最近要用纳米材料的抗菌性,准备通过96孔板,用酶标仪测定抑制生长去点,每隔两小时测一次,以前人工取样测,太麻烦了,我想确定一下,一开始菌浓度要控制在多少?以及加样量?我要测24小时,会不会到最后菌很多,超出酶标仪范围,得不到曲线呢? 望各位好心人指导一下下》。。
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carrieskl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking: 回帖置顶 2013-04-26 21:30:06
amisking: 金币+5, MicEPI+1, 应助指数+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-04-26 21:30:15
你是想在96孔板里培养然后到时间直接测吗?我觉得不大靠谱诶。。
培养24小时,100ul的培养基很可能不够。。
有的菌容易形成生物被膜,生物被膜在板底,测OD时会影响。。。
还有菌的量可能也会对耐药有影响,比如10^6和10^4比,也许6次方的菌量大,会抱团生长,中间的菌就保护下来了,而4次方的也许就抱不成团。。。
还有就是,酶标仪测OD值只能反映菌的总数变化,活的死的都算在里面,你是只要菌总数吗?
只是我的疑问,不确定。。
争做医生中最好的厨子
13楼2013-04-25 23:24:26
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carrieskl

木虫 (著名写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-04-19 19:05:54
你可以这样做,先把菌液在96孔板加好,再加你的药液。每孔加200ul菌液,然后按照二倍稀释法去加药液...

96孔板每孔容积一般在250-300ul左右,加液体顶多加到200ul不然很容易污染啊,摇匀时也容易洒。。。你说加200ul菌液再加药液就盛不下了。
争做医生中最好的厨子
14楼2013-04-26 00:01:39
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carrieskl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by smallhorse88 at 2013-04-26 16:42:18
是呀,我们使用酶标仪直接测的呢...我就是不知道这样做行不行呢...

还是要在管里培养再每个时刻取样测OD
就是把菌液接种到培养基里(比如100ml)加药 然后摇匀分装很多管 每个时间点拿出一管测OD值
争做医生中最好的厨子
16楼2013-04-26 17:00:36
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