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clish

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 冷冻干燥蛋白的问题

我把蛋白透析后进行冷冻干燥,用的那种挂瓶式的冷冻干燥机。因为实验平台的要求,,必须将样品放在挂瓶中进行干燥。室温30℃+(屋内有多台仪器,且空调坏了),冷阱内温度低于0下40℃,但是不知道挂瓶内的温度会不会过高对我的蛋白造成影响?
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happybenny

铁杆木虫 (正式写手)

对不起,我可能说的不准确,可能挂瓶里的温度没有-40度,但是肯定一点的是,挂瓶里的温度是很低的,因为我们实验室也有类似的冻干机,即使室内温度很高,但是挂瓶外壁的温度却是很低的,手摸上去都是冰凉的。
3楼2013-04-14 11:30:52
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晨萍之水

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该不会,出来跑下电泳就知道了。。。
~勇敢和执着也是一种霸气~
4楼2013-04-14 12:31:19
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happybenny

铁杆木虫 (正式写手)

想起来了,如果样品量很少的话,应该不会有冰凉的感觉,我们冻的样品体积很大,就会有冰凉的感觉,不过放心,你那冻干瓶里接近真空,应该不会引起蛋白变性的,正常情况下,一般冻成干粉都可以室温保存的,你那还在接近真空的条件下,更不会引起变性的。
6楼2013-04-15 11:32:42
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fuding6

木虫 (小有名气)

你们实验平台的要求还真奇怪,居然要求蛋白一定要用挂瓶的方式冻干。只要冻干过程不融化,应该都能冻干,如果有冻干曲线,那冻干效果会更好。另外,冻蛋白,如果不加点赋形剂,冻干后不容易复溶,因为部分蛋白由于空间结构破坏已经失活。
7楼2013-04-15 14:28:45
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

如果你的蛋白质不是灵敏性蛋白质就问题不大。
10楼2013-04-15 16:02:28
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fuding6

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by clish at 2013-04-15 15:52:07
我们的蛋白一般都在-20保存的,有些人还喜欢放在-80,都没听说不行的。
我看文献里和别人的操作都是冻干的,这种方法不好的话,还有别的方法么?...

肯定是冻干了,但具体怎么冻,细节性的东西文献里不一定就会写的很清楚。其实,你只要能冻干,有生物活性就行。祝顺利。
12楼2013-04-16 15:57:07
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普通回帖

happybenny

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
clish: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2013-04-14 12:40:04
肯定不会,你那挂瓶的温度和冷井温度是一致的,即零下-40度。
2楼2013-04-14 11:27:58
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clish

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by happybenny at 2013-04-14 11:30:52
对不起,我可能说的不准确,可能挂瓶里的温度没有-40度,但是肯定一点的是,挂瓶里的温度是很低的,因为我们实验室也有类似的冻干机,即使室内温度很高,但是挂瓶外壁的温度却是很低的,手摸上去都是冰凉的。

我刚刚特地摘了手套去感觉了一下,没有冰凉的感觉,摘下挂瓶之后立马去摸里面,也没有感觉温度很低的样子
但愿我的蛋白不会出问题
5楼2013-04-14 12:41:24
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clish

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by happybenny at 2013-04-15 11:32:42
想起来了,如果样品量很少的话,应该不会有冰凉的感觉,我们冻的样品体积很大,就会有冰凉的感觉,不过放心,你那冻干瓶里接近真空,应该不会引起蛋白变性的,正常情况下,一般冻成干粉都可以室温保存的,你那还在接 ...

已经冻干完了,只能回头在实验里看能不能用了。
8楼2013-04-15 15:50:18
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clish

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by fuding6 at 2013-04-15 14:28:45
你们实验平台的要求还真奇怪,居然要求蛋白一定要用挂瓶的方式冻干。只要冻干过程不融化,应该都能冻干,如果有冻干曲线,那冻干效果会更好。另外,冻蛋白,如果不加点赋形剂,冻干后不容易复溶,因为部分蛋白由于空 ...

我们的蛋白一般都在-20保存的,有些人还喜欢放在-80,都没听说不行的。
我看文献里和别人的操作都是冻干的,这种方法不好的话,还有别的方法么?
9楼2013-04-15 15:52:07
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