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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 冷冻干燥蓝藻样的温度设定
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哈哈稀奇

新虫 (初入文坛)

[求助] 冷冻干燥蓝藻样的温度设定

我要测蓝藻里面的DNA、RNA和蛋白质，而且含量想用单位质量干重所含的量来表示，所以准备冷冻干燥处理。想请教一下，对于离心后的藻样，冷冻干燥机的温度应该设置成多少，才能在不影响藻里面这三种物质的测定的前提下，把藻干燥好。还有，我可能是拿着50ml的离心管去干燥，每个管子里面得藻团不超过1ml，冷冻后会不会膨胀到管子外面，请大家教教我啊。
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探索
1楼 2011-09-20 17:17:22
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

哈哈稀奇(金币+5): 很感谢啊 有个参照了 2011-09-20 21:53:19
哈哈稀奇(金币+3): 2011-10-27 10:19:26
冷冻干燥一般是-30℃的。50mL的话应该不会将藻团膨胀出去的。
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2楼2011-09-20 17:24:53
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哈哈稀奇

新虫 (初入文坛)
我自己再顶一顶啊  求助有经验的大侠们啊
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探索
3楼2011-09-21 18:10:37
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虫儿7893

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

哈哈稀奇(金币+3): 2011-10-27 10:19:36
冷冻干燥一般要加些保护剂，比如脱脂奶粉；
温度应该是越低越好吧，我们实验室冷冻干燥设备是-80度的；
一般样品要先在冰箱里冷冻再冻干，样品不会膨胀到外面。
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4楼2011-09-22 10:12:48
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martinlitao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

哈哈稀奇(金币+3): 2011-10-27 10:19:55
如果需要冻干的微藻量很大，最好先在-45℃下预冻几个小时，之后迅速转移物料至冻干室，按设定的温度程序进行升华，抽真空。我一般从-40℃开始冻干，每隔2-4h，升5℃，最后升至常温20℃结束，总共28h。
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记忆像叠在一起的写满文字的稿纸，被一杯水打湿了，渐渐那些文字模糊了，重叠了
5楼2011-09-22 11:01:18
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

哈哈稀奇(金币+2): 2011-10-27 10:20:07
不知道你试验的目的，如果要获取准确的数据，至少你离心收集藻体的过程会引起RNA代谢的改变；

如果仅仅是评价一下，可以按照你说的去做，一般的冷冻干燥系统都能够胜任；预先放在-80°下冷冻充分，然后去抽。
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致良知
6楼2011-09-22 23:55:59
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bimuduoer

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

哈哈稀奇(金币+3): 2011-10-27 10:20:17
首先想确定一下你用的什么牌子的冻干机，是否Christ的吗，如果是的话，参数我还能知道一些，别的牌子我就不知道了。个人觉得由于你的样品含水量较大，所以建议首先在-80℃或者液氮预冻，迅速移至预热好的冻干机内。主冻干过程觉得你的东西比较麻烦，如果想快速冻干，那么主冻干过程真空度调大一些，但是这样你的得率肯定会低，如果真空度调小，那么冻干时间会延长很多，但是得率应该高些，你个人酌情选择吧。后冻干过程温度-4℃吧，真空度要低一些，1-2h即可。
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7楼2011-09-28 12:29:21
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四环冻干机

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

哈哈稀奇(金币+1): 2011-10-27 10:20:22
用冻干机来冷冻干燥肯定是冷阱温度越低越好啦，尽可能的延长升华干燥前期时间在0度以下，冻干工艺设定最高温度不能超过+28度。其它的不会发生变化，不用担心！
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生化科学仪器
8楼2011-09-29 09:43:20
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wangyuan1014

新虫 (初入文坛)
请问你知道怎么提取水样中的蓝藻吗，以及测鱼体内的蓝藻含量，如果知道麻烦你指教指教哦
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9楼2015-07-19 15:45:34
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