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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 冷冻干燥蛋白的问题
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clish

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 冷冻干燥蛋白的问题

我把蛋白透析后进行冷冻干燥，用的那种挂瓶式的冷冻干燥机。因为实验平台的要求，，必须将样品放在挂瓶中进行干燥。室温30℃+（屋内有多台仪器，且空调坏了），冷阱内温度低于0下40℃，但是不知道挂瓶内的温度会不会过高对我的蛋白造成影响？
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1楼 2013-04-14 10:11:16
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

happybenny

铁杆木虫 (正式写手)
对不起，我可能说的不准确，可能挂瓶里的温度没有-40度，但是肯定一点的是，挂瓶里的温度是很低的，因为我们实验室也有类似的冻干机，即使室内温度很高，但是挂瓶外壁的温度却是很低的，手摸上去都是冰凉的。
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3楼2013-04-14 11:30:52
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晨萍之水

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该不会，出来跑下电泳就知道了。。。
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~勇敢和执着也是一种霸气~
4楼2013-04-14 12:31:19
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happybenny

铁杆木虫 (正式写手)
想起来了，如果样品量很少的话，应该不会有冰凉的感觉，我们冻的样品体积很大，就会有冰凉的感觉，不过放心，你那冻干瓶里接近真空，应该不会引起蛋白变性的，正常情况下，一般冻成干粉都可以室温保存的，你那还在接近真空的条件下，更不会引起变性的。
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6楼2013-04-15 11:32:42
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fuding6

木虫 (小有名气)
你们实验平台的要求还真奇怪，居然要求蛋白一定要用挂瓶的方式冻干。只要冻干过程不融化，应该都能冻干，如果有冻干曲线，那冻干效果会更好。另外，冻蛋白，如果不加点赋形剂，冻干后不容易复溶，因为部分蛋白由于空间结构破坏已经失活。
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7楼2013-04-15 14:28:45
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
如果你的蛋白质不是灵敏性蛋白质就问题不大。
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10楼2013-04-15 16:02:28
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fuding6

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by clish at 2013-04-15 15:52:07
我们的蛋白一般都在-20保存的，有些人还喜欢放在-80，都没听说不行的。
我看文献里和别人的操作都是冻干的，这种方法不好的话，还有别的方法么？...

肯定是冻干了，但具体怎么冻，细节性的东西文献里不一定就会写的很清楚。其实，你只要能冻干，有生物活性就行。祝顺利。
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12楼2013-04-16 15:57:07
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普通回帖

happybenny

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
clish: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2013-04-14 12:40:04
肯定不会，你那挂瓶的温度和冷井温度是一致的，即零下-40度。
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2楼2013-04-14 11:27:58
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clish

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by happybenny at 2013-04-14 11:30:52
对不起，我可能说的不准确，可能挂瓶里的温度没有-40度，但是肯定一点的是，挂瓶里的温度是很低的，因为我们实验室也有类似的冻干机，即使室内温度很高，但是挂瓶外壁的温度却是很低的，手摸上去都是冰凉的。

我刚刚特地摘了手套去感觉了一下，没有冰凉的感觉，摘下挂瓶之后立马去摸里面，也没有感觉温度很低的样子
但愿我的蛋白不会出问题
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5楼2013-04-14 12:41:24
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clish

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by happybenny at 2013-04-15 11:32:42
想起来了，如果样品量很少的话，应该不会有冰凉的感觉，我们冻的样品体积很大，就会有冰凉的感觉，不过放心，你那冻干瓶里接近真空，应该不会引起蛋白变性的，正常情况下，一般冻成干粉都可以室温保存的，你那还在接 ...

已经冻干完了，只能回头在实验里看能不能用了。
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8楼2013-04-15 15:50:18
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clish

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by fuding6 at 2013-04-15 14:28:45
你们实验平台的要求还真奇怪，居然要求蛋白一定要用挂瓶的方式冻干。只要冻干过程不融化，应该都能冻干，如果有冻干曲线，那冻干效果会更好。另外，冻蛋白，如果不加点赋形剂，冻干后不容易复溶，因为部分蛋白由于空 ...

我们的蛋白一般都在-20保存的，有些人还喜欢放在-80，都没听说不行的。
我看文献里和别人的操作都是冻干的，这种方法不好的话，还有别的方法么？
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9楼2013-04-15 15:52:07
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