| 查看: 2046 | 回复: 7 | |||
[交流]
请教微生物菌种保藏低温保护剂的有关问题
|
|||
| 最近看外文资料有关微生物低温保护剂的，只是在有关文献有看到，，但是为什么选择那样的低温保护剂或者是哪一类的低温保护剂，原理等还是摸不清头脑，，这里是否有大虾在这个方面有了解的，或者有这方面书籍资料的，就出来冒泡救救这位小虾！！邮箱：Yanqiaoli321@126.com |
回复此楼» 猜你喜欢
（调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生
已经有4人回复
-
085602调剂 初试总分335
已经有8人回复
-
材料求调剂
已经有8人回复
-
求调剂
已经有7人回复
-
277求调剂
已经有6人回复
-
求调剂
已经有5人回复
-
一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂
已经有10人回复
-
283求调剂
已经有6人回复
-
一志愿郑州大学085600求调剂
已经有8人回复
-
285求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- CGMCC中国普通微生物菌种保藏中心-邮寄真菌的要求
已经有3人回复
- 怎样保藏菌种！
已经有14人回复
- 各位大侠，我们来一起讨论下菌种退化问题，怎么防止，书上说的不适用
已经有12人回复
- 中国工业微生物菌种保藏管理中心招聘信息
已经有14人回复
- 菌种传代的问题
已经有11人回复
- 菌种活化与保存的方法
已经有16人回复
- 微生物菌种保藏和分离等书籍免费整本下载
已经有47人回复
- 菌种保藏
已经有22人回复
- 菌种保存
已经有7人回复
- 菌种购买及保存问题
已经有16人回复
- 请教菌种冻存后如何复苏？
已经有8人回复
- 急，急，急-关于菌种复壮问题
已经有32人回复
- 【求助/交流】求助关于菌种保存的相关小知识
已经有20人回复
- 【求助】请问有人在网上购买过微生物菌种吗？
已经有12人回复
- 【求助/交流】菌种冷冻干燥保存的问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】菌种保藏-甘油管和液氮相关
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于霉菌菌种保藏
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于菌种的计数问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】菌种保藏问题
已经有7人回复
- 【分享】微生物菌种保藏方法（步骤详细，很方便使用）
已经有8人回复
- 【求助/交流】询问菌种保存及培养问题
已经有9人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
长江大学化学与环境工程学院2026年硕士研究生调剂公告（理学、工学均可）
+1/92
-
物理学 调剂
+1/91
-
聊城大学省重点实验室 收化学专业硕士调剂、网上面试无笔试、名额充足、可调专业广泛
+1/82
-
济南大学吕伟明教授课题组招收物理学硕士调剂生
+1/76
-
浙师大化与材学院2026年有大量硕士研究生调剂名额 （线上 调剂）
+1/43
-
江苏科技大学材料学院诚招调剂生
+1/40
-
2026-大连大学～六盘水师范学院联合培养硕士研究生，招收化学、环境等相关专业
+1/38
-
2026年武汉纺织大学材料学院邓波教授团队接收调剂（硕士生4名）
+1/37
-
大连工业大学杰青/长江团队-生物质材料-储能电池方向招收2026级博士生
+1/35
-
汕头大研究生调剂招生
+1/33
-
西南科技大学杨文彬教授课题组接收材料、化工、化学类专业研究生调剂 。
+1/18
-
湖州师范大学信息工程学院2026年硕士研究生招生调剂公告
+1/16
-
重庆工商大学 招收环境/材料类方向调剂研究生
+1/9
-
中国农业大学资源与环境学院 - 招聘杰出人才（教授-专技四级）、青年研究员（副教授-�
+1/8
-
【博士招生】天津理工大学国家杰青王铁课题组招收2026年博士研究生
+1/7
-
河南理工大学 化工学院 接收调剂硕士研究生
+1/6
-
齐齐哈尔大学李莉课题组诚招2026级考研调剂生（学硕和专硕）
+1/4
-
找好工作来我这-广东唯一石化院校——资源与环境专硕招生
+1/2
-
哈尔滨工程大学动力学院赵建辉团队招收2026博士研究生
+1/1
-
北京高校副校长团队招收机械类，环境类学硕和专硕
+1/1
2楼2012-12-04 09:25:19
3楼2012-12-04 11:12:49
4楼2012-12-06 13:05:28
5楼2012-12-13 20:02:17
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
微生物的冷冻干燥保存所用的保护剂 ①酸性物质 天门冬氨酸、谷氨酸、苹果酸、乳酸 ②中性物质 葡萄糖、乳糖、蔗糖、棉籽糖、海藻糖、山梨醇、DL2苏氨酸、肌醇、木糖醇 ③碱性物质 精氨酸、组氨酸 ④高分子物质及其分解产物 白蛋白、动物胶、粘液蛋白、各种胨、肉汁、酵母汁、可溶性淀粉、糊精、海藻酸、果胶、阿拉伯胶、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP) 、羧甲基纤维素(CMC) 、藻类 ⑤天然的混合物 脱脂乳、血清、脱纤维蛋白血液 ⑥其它 抗坏血酸、半胱氨酸、羟胺、胺基脲 （1）甘油：具有良好渗透性的小分子化合物保护剂，能渗透至细胞内部，以羟基和胞内大分子形成氢键，部分取代由水分子形成的氢键，使生物体内的蛋白质、碳水化合物、脂肪和其它大分子物质在缺水条件下仍可保持其原有结构，维持生物体活力。但甘油浓度过高易造成样品发粘，不易干燥。甘油所具有的羟基可与细胞表面自由基联结，避免菌体暴露在介质中，还可与蛋白质形成氢键取代水，保证蛋白质稳定性。甘油有很强持水性，可使细胞在干燥过程中水分不至于下降太快，破坏细胞蛋白质结构而使菌体受损。但甘油浓度提高至一定程度时，对蛋白质稳定作用能力可能达到了极限，过高浓度会使冷冻干燥过程中蛋白质发生变质。冷冻时加入甘油后将发生如下变化: ①冲淡溶液中溶质(盐) 浓度,细胞摄入盐量减少,由保护剂替代; ②保护剂进入细胞,改变了胞内过冷状态,使胞内压力接近胞外压力,降低了细胞脱水皱缩程度和速度; ③保护剂进出细胞容易,缓解了复水时渗透性肿胀引起的损伤。2%，5%，10%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （2）蔗糖：非还原性低聚糖，既能起低温保护剂的功能，又能在干燥脱水过程中起脱水保护剂作用。糖生物保护作用机理有“水替代假说”和“玻璃态假说”。 在干燥过程中蔗糖形成一种玻璃态,在玻璃态下粘度极高,因而分子扩散系数很低,使大分子物质的链锻运动受阻,细胞壁的通透性降低,从而起到保护作用。生物活性保护剂要有较高的玻璃态温度，或有一定的羟基代替水，使蛋白质保持较低的主相变温度。如工作温度低于保护剂的玻璃化温度，高于被保护的活性物质的主相变温度，该活性物质就能有效保持活性。蔗糖在溶液中易结合水分子，发生水合作用，从而减缓晶核的生长过程，使形成的冰晶较细小，达到保护细胞的目的。蔗糖浓度过高，会使冻结时细胞间歇内的液体逐渐浓缩，从而使电解质的浓度显著增加，产生溶质损伤效应，导致细胞脱水死亡。5%，10%,15%,20%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （3）脱脂奶粉：常见的高分子保护剂，溶于水后使溶液呈过冷状态，在冰点以下的相同温度该溶液中的溶质浓度较小，蛋白质盐析变形较小。脱脂奶粉能减少细胞暴露于氧气和介质中的面积，同时在菌体表面形成保护层，减少由于细胞壁损坏而引起的胞内物质泄漏而起保护作用。干燥时，奶粉中的乳清蛋白能在菌体外形成蛋白膜，对细胞加以保护，并可固定冻干酶类，防止由于细胞壁蛋白质损坏而引起的胞内物质泄漏,而且乳中其它成分(如乳糖等) 同样可提高菌体的冻干存活率。脱脂奶粉主要在细胞表面起保护层作用。奶粉中其它成分也可以提高菌体冻干存活率。当脱脂奶粉浓度过高时，菌体表面完全被保护剂覆盖，奶粉中的乳糖会对细胞造成损伤使冻干存活率下降。5%，10%，15%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （4）聚合物类：简单小分子经过聚合反应后，形成的巨大分子。聚合物类保护剂的性质：聚合物在冻结过程中优先析出；具有一定的表面活性；提高溶液粘度；显著提高玻璃化转变温度；抑制溶液pH的降低。可以起低温保护剂和脱水保护剂作用。β-环状糊精是一种大分子多糖，具有环状孔洞分子结构，一般为食品添加剂，广泛用于固体饮料制造，既能阻止细胞在干燥时的收缩变硬，提高其外观品质，又能提高产品复水率。5%，10%，15%，20%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （5）L-半胱氨酸盐酸盐：抗氧化剂，在冷冻干燥和储藏过程中，细胞内蛋白质可能与空气中的氧发生氧化作用，引起变质，常在冻干样品配方中添加适量抗氧化剂提高稳定性。5%，10%，15%，20%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （6）吐温-80：表面活性剂既能在冻结和脱水过程中降低冰-水界面张力所引起的冻结和脱水变性，又能在复水过程中对表面活性剂组分起到润湿剂和重褶皱剂的作用，为常用的非离 子型表面活性剂。5%，10%，15%，20%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （7）海藻糖：海藻糖具有特殊的水合作用, 在冷冻干燥生物制品方面具有广阔的应用前景。具有稳定细胞膜和蛋白质结构、抗逆保鲜的作用,在生物保藏方面有着其它保护剂不可比拟的优势,但目前国内尚未工业化大规模生产海藻糖,成本较高。 |
8楼2013-02-03 15:40:08
简单回复
su-b086楼
2012-12-13 21:44
回复
su-b087楼
2012-12-15 19:16
回复
