| 查看: 2045 | 回复: 7 | |||
[交流]
请教微生物菌种保藏低温保护剂的有关问题
|
|||
| 最近看外文资料有关微生物低温保护剂的，只是在有关文献有看到，，但是为什么选择那样的低温保护剂或者是哪一类的低温保护剂，原理等还是摸不清头脑，，这里是否有大虾在这个方面有了解的，或者有这方面书籍资料的，就出来冒泡救救这位小虾！！邮箱：Yanqiaoli321@126.com |
回复此楼» 猜你喜欢
307分材料专业求调剂
已经有6人回复
-
材料专硕283求调剂
已经有14人回复
-
327求调剂
已经有3人回复
-
计算机11408，286分求调剂
已经有6人回复
-
材料调剂
已经有14人回复
-
一志愿南昌大学，085600，344分求调剂
已经有3人回复
-
考研调剂生寻找导师
已经有3人回复
-
材料0856 英一数二 323 求调剂
已经有14人回复
-
308求调剂
已经有5人回复
-
化学0703-一志愿211-338分求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- CGMCC中国普通微生物菌种保藏中心-邮寄真菌的要求
已经有3人回复
- 怎样保藏菌种！
已经有14人回复
- 各位大侠，我们来一起讨论下菌种退化问题，怎么防止，书上说的不适用
已经有12人回复
- 中国工业微生物菌种保藏管理中心招聘信息
已经有14人回复
- 菌种传代的问题
已经有11人回复
- 菌种活化与保存的方法
已经有16人回复
- 微生物菌种保藏和分离等书籍免费整本下载
已经有47人回复
- 菌种保藏
已经有22人回复
- 菌种保存
已经有7人回复
- 菌种购买及保存问题
已经有16人回复
- 请教菌种冻存后如何复苏？
已经有8人回复
- 急，急，急-关于菌种复壮问题
已经有32人回复
- 【求助/交流】求助关于菌种保存的相关小知识
已经有20人回复
- 【求助】请问有人在网上购买过微生物菌种吗？
已经有12人回复
- 【求助/交流】菌种冷冻干燥保存的问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】菌种保藏-甘油管和液氮相关
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于霉菌菌种保藏
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于菌种的计数问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】菌种保藏问题
已经有7人回复
- 【分享】微生物菌种保藏方法（步骤详细，很方便使用）
已经有8人回复
- 【求助/交流】询问菌种保存及培养问题
已经有9人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
齐齐哈尔大学材料科学与工程学院 诚招调剂生
+1/977
-
招收硕士研究生
+5/541
-
三峡大学材料与化工学院高分子化工新材料课题组现招收化学学术型硕士研究生2名。
+1/482
-
济南大学建材重点实验室接受调剂！！！
+1/192
-
延安大学化学与化工学院接收化学专业调剂生（工科、理学均可调剂）
+5/165
-
铟锡化合物半导体材料与器件团队[推介]
+3/151
-
招化学相关专业硕士调剂生
+1/89
-
山东青岛-导师招生
+1/51
-
哈尔滨工业大学化工学院中俄联合办学硕士生招生
+1/22
-
【硕士调剂】【分子医学 10医类 最后机会】2026年青岛大学硕士调剂补招
+1/21
-
北京理工大学（珠海）招收2026级考核制博士
+1/18
-
西安工程大学能源化工新材料研发项目组接收2026年计算机类调剂研究生
+1/13
-
省双一流重点学科，国家一流专业，轻工技术与工程，生物质能源与材料
+1/10
-
吉林工程技术师范学院 材料与化工 （0856） 招收调剂
+1/7
-
广东省五邑大学MOFs催化功能材料课题组招收化学/材料背景调剂生
+1/4
-
华东师范大学-分析化学-招收1名博士研究生 (2026年，第二批)
+1/4
-
大湾区大学李军课题组招收生物信息学、人工智能方向博士后
+1/4
-
欢迎广大考生调剂到西安工程大学环境与化学工程学院
+1/3
-
上海应用技术大学化工院招收调剂
+1/2
-
哈尔滨工程大学动力学院赵建辉团队招收2026博士研究生
+1/2
2楼2012-12-04 09:25:19
3楼2012-12-04 11:12:49
4楼2012-12-06 13:05:28
5楼2012-12-13 20:02:17
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
微生物的冷冻干燥保存所用的保护剂 ①酸性物质 天门冬氨酸、谷氨酸、苹果酸、乳酸 ②中性物质 葡萄糖、乳糖、蔗糖、棉籽糖、海藻糖、山梨醇、DL2苏氨酸、肌醇、木糖醇 ③碱性物质 精氨酸、组氨酸 ④高分子物质及其分解产物 白蛋白、动物胶、粘液蛋白、各种胨、肉汁、酵母汁、可溶性淀粉、糊精、海藻酸、果胶、阿拉伯胶、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP) 、羧甲基纤维素(CMC) 、藻类 ⑤天然的混合物 脱脂乳、血清、脱纤维蛋白血液 ⑥其它 抗坏血酸、半胱氨酸、羟胺、胺基脲 （1）甘油：具有良好渗透性的小分子化合物保护剂，能渗透至细胞内部，以羟基和胞内大分子形成氢键，部分取代由水分子形成的氢键，使生物体内的蛋白质、碳水化合物、脂肪和其它大分子物质在缺水条件下仍可保持其原有结构，维持生物体活力。但甘油浓度过高易造成样品发粘，不易干燥。甘油所具有的羟基可与细胞表面自由基联结，避免菌体暴露在介质中，还可与蛋白质形成氢键取代水，保证蛋白质稳定性。甘油有很强持水性，可使细胞在干燥过程中水分不至于下降太快，破坏细胞蛋白质结构而使菌体受损。但甘油浓度提高至一定程度时，对蛋白质稳定作用能力可能达到了极限，过高浓度会使冷冻干燥过程中蛋白质发生变质。冷冻时加入甘油后将发生如下变化: ①冲淡溶液中溶质(盐) 浓度,细胞摄入盐量减少,由保护剂替代; ②保护剂进入细胞,改变了胞内过冷状态,使胞内压力接近胞外压力,降低了细胞脱水皱缩程度和速度; ③保护剂进出细胞容易,缓解了复水时渗透性肿胀引起的损伤。2%，5%，10%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （2）蔗糖：非还原性低聚糖，既能起低温保护剂的功能，又能在干燥脱水过程中起脱水保护剂作用。糖生物保护作用机理有“水替代假说”和“玻璃态假说”。 在干燥过程中蔗糖形成一种玻璃态,在玻璃态下粘度极高,因而分子扩散系数很低,使大分子物质的链锻运动受阻,细胞壁的通透性降低,从而起到保护作用。生物活性保护剂要有较高的玻璃态温度，或有一定的羟基代替水，使蛋白质保持较低的主相变温度。如工作温度低于保护剂的玻璃化温度，高于被保护的活性物质的主相变温度，该活性物质就能有效保持活性。蔗糖在溶液中易结合水分子，发生水合作用，从而减缓晶核的生长过程，使形成的冰晶较细小，达到保护细胞的目的。蔗糖浓度过高，会使冻结时细胞间歇内的液体逐渐浓缩，从而使电解质的浓度显著增加，产生溶质损伤效应，导致细胞脱水死亡。5%，10%,15%,20%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （3）脱脂奶粉：常见的高分子保护剂，溶于水后使溶液呈过冷状态，在冰点以下的相同温度该溶液中的溶质浓度较小，蛋白质盐析变形较小。脱脂奶粉能减少细胞暴露于氧气和介质中的面积，同时在菌体表面形成保护层，减少由于细胞壁损坏而引起的胞内物质泄漏而起保护作用。干燥时，奶粉中的乳清蛋白能在菌体外形成蛋白膜，对细胞加以保护，并可固定冻干酶类，防止由于细胞壁蛋白质损坏而引起的胞内物质泄漏,而且乳中其它成分(如乳糖等) 同样可提高菌体的冻干存活率。脱脂奶粉主要在细胞表面起保护层作用。奶粉中其它成分也可以提高菌体冻干存活率。当脱脂奶粉浓度过高时，菌体表面完全被保护剂覆盖，奶粉中的乳糖会对细胞造成损伤使冻干存活率下降。5%，10%，15%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （4）聚合物类：简单小分子经过聚合反应后，形成的巨大分子。聚合物类保护剂的性质：聚合物在冻结过程中优先析出；具有一定的表面活性；提高溶液粘度；显著提高玻璃化转变温度；抑制溶液pH的降低。可以起低温保护剂和脱水保护剂作用。β-环状糊精是一种大分子多糖，具有环状孔洞分子结构，一般为食品添加剂，广泛用于固体饮料制造，既能阻止细胞在干燥时的收缩变硬，提高其外观品质，又能提高产品复水率。5%，10%，15%，20%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （5）L-半胱氨酸盐酸盐：抗氧化剂，在冷冻干燥和储藏过程中，细胞内蛋白质可能与空气中的氧发生氧化作用，引起变质，常在冻干样品配方中添加适量抗氧化剂提高稳定性。5%，10%，15%，20%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （6）吐温-80：表面活性剂既能在冻结和脱水过程中降低冰-水界面张力所引起的冻结和脱水变性，又能在复水过程中对表面活性剂组分起到润湿剂和重褶皱剂的作用，为常用的非离 子型表面活性剂。5%，10%，15%，20%，无菌水对照，每种浓度做一组平行取平均值。 （7）海藻糖：海藻糖具有特殊的水合作用, 在冷冻干燥生物制品方面具有广阔的应用前景。具有稳定细胞膜和蛋白质结构、抗逆保鲜的作用,在生物保藏方面有着其它保护剂不可比拟的优势,但目前国内尚未工业化大规模生产海藻糖,成本较高。 |
8楼2013-02-03 15:40:08
简单回复
su-b086楼
2012-12-13 21:44
回复
su-b087楼
2012-12-15 19:16
回复
