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nick.nye-0313铜虫 (小有名气)
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[求助]
求心肌组织总蛋白提取注意事项
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| 求心肌组织总蛋白提取注意事项，我们用凯基的全蛋白提取盒，使用液氮研碎心肌组织，后加入裂解液，用细胞破碎仪超声（冰水上操作），离心取上清。我想问有么有人用同样的方法提取总蛋白，有的话能否介绍一下经验。超声多久，功率多大，如何超声才能使细胞破碎的好且又 不至于使蛋白变性。我取心肌组织30mg，加入250ulLysis buffer, 我每次超一下(超半秒)，一组样本轮回超3轮，然后10000转离心5分钟取上清。可是做acting发现不齐。是定量的问题还是，蛋白没提出来？希望大虾指教！！！不胜感激！ |
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2楼2013-04-13 23:54:05
leechau2007
木虫 (初入文坛)
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3楼2013-04-15 17:51:57