应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教有关活性电泳的问题
81/1返回列表
查看: 1207  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

卷儿1988

铁虫 (小有名气)

[求助] 请教有关活性电泳的问题

最近在做活性电泳，要检测透明质酸酶的活性，采用的是在分离胶中加入底物HA，活性电泳后孵育后进行染色，有酶的位置不能染色会显现出来。但是结果一直是酶跑不下去，一直处于上样孔下面的位置，试了各种电压都是这种状况，有没有高手帮忙分析一下啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-09 18:56:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chengjg

木虫 (正式写手)
看看有没有电流啊 还有溴酚蓝往不往下跑啊？
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-10 08:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卷儿1988

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chengjg at 2013-04-10 08:55:06
看看有没有电流啊 还有溴酚蓝往不往下跑啊？

有电流，溴酚蓝也往下跑，就是蛋白不动。
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-10 08:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaojuan1985

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-15 09:47:22
你的蛋白的等电点与你用的缓冲液体系不匹配，换个缓冲液体系。上网查查，酸性蛋白和碱性蛋白适用的电泳体系是不一样的。
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-10 09:59:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卷儿1988

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-04-10 09:59:45
你的蛋白的等电点与你用的缓冲液体系不匹配，换个缓冲液体系。上网查查，酸性蛋白和碱性蛋白适用的电泳体系是不一样的。

有这个可能性，但是不知道现在这个酶的等电点，是否需要测一下，如何测，还请指点一下~
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-10 10:28:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaojuan1985

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩 2013-04-15 09:47:34
你是粗酶液，也不好测等电点。看看文献报道的这类酶大概是多少，另外，可以根据活性判断一下，在最适pH附近。
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-10 17:45:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卷儿1988

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-04-10 17:45:52
你是粗酶液，也不好测等电点。看看文献报道的这类酶大概是多少，另外，可以根据活性判断一下，在最适pH附近。

最适PH在5左右，与电泳结果不相符
赞一下 回复此楼
7楼2013-04-15 09:08:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuxiaomei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 卷儿1988 at 2013-04-10 08:58:44
有电流，溴酚蓝也往下跑，就是蛋白不动。...

是不是你的电极插反了？或者你应该跑低pH的电泳
赞一下 回复此楼
要是能再年轻几岁多好啊！
8楼2014-03-07 08:54:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 卷儿1988 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 321求调剂 +8 何润采123 2026-03-18 8/400 2026-03-19 15:23 by 丁丁*
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +11 yangfz 2026-03-17 11/550 2026-03-19 15:06 by houyaoxu
[考研] 本科郑州大学物理学院，一志愿华科070200学硕，346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +4 守候夕阳CF 2026-03-18 4/200 2026-03-18 22:16 by li123456789.
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭