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wsmcc

金虫 (小有名气)


[交流] 细胞瞬时转染和质粒复制

大家好!
我有个问题
最近在做细胞转染,用的是293细胞和pcDNA3.1质粒。
我想问的是,质粒会在细胞中复制么?

如果质粒在细胞中复制,为什么又要筛选做稳定株?
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)



wsmcc(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
5楼: Originally posted by wsmcc at 2013-03-13 13:29:28
可是,我看到论坛里有人说,有SV40和T抗原就可以,可是如果有的话,又为何要做稳定株筛选?穿梭质粒的定义里面,有可以复制这一说呀...

我觉得是这样。质粒的复制和染色体不同步,拷贝数不是很稳定。因此,在穿梭质粒表达的话可能随着细胞生长状态、时期而变化,所以需要做稳定株。
7楼2013-03-13 14:38:30
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lidonghong

金虫 (正式写手)



wsmcc(金币+1): 谢谢参与
这个嘛,说说我的理解,一开始转染进去时可以复制的,但是随着培养的时间的延长,细胞发现这个质粒不是本身的东西所以就清除掉了。。。。
2楼2013-03-13 11:22:42
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userhung

禁虫 (文学泰斗)


3楼2013-03-13 11:25:54
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wsmcc

金虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by userhung at 2013-03-13 11:25:54
http://www.dxy.cn/bbs/topic/11879975
http://www.dxy.cn/bbs/topic/11626894

我看了您的链接,貌似没有相关性……
4楼2013-03-13 13:28:02
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