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田甜思

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白表达分子量偏大 已有1人参与

最近在做重组蛋白表达,表达之后也有目的条带,但是就是分子量比理论值要偏大。我的质粒是经过测序的,没有碱基的缺失和突变。另外,我做的是SDS-PAGE.偏大5-50都不等,各位大师帮帮忙,解决下...  着急啊!!!
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田甜思

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-13 00:21:10
SDS-PAGE确定的分子量不是很准确的,有些蛋白的疏水性强,等电点高,在胶上跑得慢也不足为奇。只要确定表达的蛋白正确就可以了。

哦 谢谢
4楼2013-03-13 16:36:40
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
SDS-PAGE确定的分子量不是很准确的,有些蛋白的疏水性强,等电点高,在胶上跑得慢也不足为奇。只要确定表达的蛋白正确就可以了。
2楼2013-03-13 00:21:10
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linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有些偏大很常见的,可以通过表达测试时设置阴性对照来初步确认。
进一步确认可以通过活性检测。
小兵一个
3楼2013-03-13 13:13:03
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田甜思

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by linxt2005 at 2013-03-13 13:13:03
有些偏大很常见的,可以通过表达测试时设置阴性对照来初步确认。
进一步确认可以通过活性检测。

对照是有的 就是表达的目的蛋白偏大
5楼2013-03-13 16:37:17
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