24小时热门版块排行榜    

查看: 3959  |  回复: 3

Yummyoo

金虫 (小有名气)

[求助] PCR产物末端加A,Taq酶的选择

请问,我需要在PCR产物的末端加A,以便连接T载体,是先用PFU酶高保真扩增,在用Taq酶加A好,还是直接用Taq酶PCR好?
    选的Taq酶的话,是用PCR  Mix好,还是各试剂分装的好,谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Yummyoo: 金币+4, 有帮助 2013-03-12 20:09:12
这要看你的目的是什么了,如果是用来表达的,需高保真酶。

我是先用phusion酶高保真扩增,在用Taq酶加A。

近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。详细内容,可自己查相关资料。
2楼2013-03-12 17:25:50
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
Yummyoo: 金币+2, 有帮助 2013-03-12 20:09:35
近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。

这个试剂盒不用加A尾,末端有15个相同碱基即可发重组。

详细内容,可自己查相关资料。
3楼2013-03-12 17:28:32
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Yummyoo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-03-12 17:25:50
这要看你的目的是什么了,如果是用来表达的,需高保真酶。

我是先用phusion酶高保真扩增,在用Taq酶加A。

近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。详细内容,可自己查相关资料。

谢谢回复
4楼2013-03-12 18:22:05
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Yummyoo 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +3 大火山小火山 2026-03-16 4/200 2026-03-16 16:47 by houyaoxu
[考研] 0703化学336分求调剂 +3 zbzihdhd 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by 我的船我的海
[考研] 283求调剂 +10 小楼。 2026-03-12 14/700 2026-03-16 16:08 by 13811244083
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-15 6/300 2026-03-16 08:00 by wang_dand
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿郑大070303,338分,求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 285化工学硕求调剂(081700) +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 304求调剂(085602一志愿985) +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂0856材料化工 +12 z2839474511 2026-03-11 13/650 2026-03-13 10:39 by peike
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
请填处理意见