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Yummyoo

金虫 (小有名气)

[求助] PCR产物末端加A,Taq酶的选择

请问,我需要在PCR产物的末端加A,以便连接T载体,是先用PFU酶高保真扩增,在用Taq酶加A好,还是直接用Taq酶PCR好?
    选的Taq酶的话,是用PCR  Mix好,还是各试剂分装的好,谢谢
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Yummyoo: 金币+4, 有帮助 2013-03-12 20:09:12
这要看你的目的是什么了,如果是用来表达的,需高保真酶。

我是先用phusion酶高保真扩增,在用Taq酶加A。

近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。详细内容,可自己查相关资料。
2楼2013-03-12 17:25:50
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
Yummyoo: 金币+2, 有帮助 2013-03-12 20:09:35
近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。

这个试剂盒不用加A尾,末端有15个相同碱基即可发重组。

详细内容,可自己查相关资料。
3楼2013-03-12 17:28:32
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Yummyoo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-03-12 17:25:50
这要看你的目的是什么了,如果是用来表达的,需高保真酶。

我是先用phusion酶高保真扩增,在用Taq酶加A。

近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。详细内容,可自己查相关资料。

谢谢回复
4楼2013-03-12 18:22:05
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