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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物末端加A，Taq酶的选择
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Yummyoo

金虫 (小有名气)

[求助] PCR产物末端加A，Taq酶的选择

请问，我需要在PCR产物的末端加A，以便连接T载体，是先用PFU酶高保真扩增，在用Taq酶加A好，还是直接用Taq酶PCR好？
    选的Taq酶的话，是用PCR  Mix好，还是各试剂分装的好，谢谢
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1楼 2013-03-12 15:53:27
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Yummyoo: 金币+4, ★有帮助 2013-03-12 20:09:12
这要看你的目的是什么了，如果是用来表达的，需高保真酶。

我是先用phusion酶高保真扩增，在用Taq酶加A。

近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。详细内容，可自己查相关资料。
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2楼2013-03-12 17:25:50
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
Yummyoo: 金币+2, ★有帮助 2013-03-12 20:09:35
近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。

这个试剂盒不用加A尾，末端有15个相同碱基即可发重组。

详细内容，可自己查相关资料。
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3楼2013-03-12 17:28:32
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Yummyoo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-03-12 17:25:50
这要看你的目的是什么了，如果是用来表达的，需高保真酶。

我是先用phusion酶高保真扩增，在用Taq酶加A。

近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。详细内容，可自己查相关资料。

谢谢回复
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4楼2013-03-12 18:22:05
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