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sjjsy7银虫 (小有名气)
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关于PFU酶扩增
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最近用PFU酶想克隆几个水稻基因，可是死活扩不出，先说一下我的体系吧 25ul体系 dd水14.75ul 10X PFU Buffer2.5ul dNTP1ul 引物0.5ul PFU酶0.3ul temp 1ul 退火温度55度，延伸2分钟 最后跑胶的时候连引物二聚体也没有，是不是引物不行啊，还有就是我下一步是接T载体，有人跟我说用PFU扩最后还得另外加A尾巴，Taq酶不用，到底是个什么情况？  还请哪位虫虫指点迷津！！！！！！！！ |
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