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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

[求助] M9培养基摇菌

为什么我的BL21在M9培养基中摇菌37度二十多小时,菌液才能变混浊?正常情况应该多长时间?
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jiapingshk: 金币+10, 有帮助 2013-03-13 09:19:20
大肠杆菌在M9中的培养情况和在LB中培养时间区别不大,应该在6小时左右就已经非常浑浊了,20小时超出理解范围,我也不知道为什么了。
2楼2013-03-11 14:37:04
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noheart2179

铁虫 (小有名气)

你是挑的菌落还是转的菌液?菌落/菌液是新鲜长出来的,还是放了很久的了?
如果有来生,请与我擦肩而过
3楼2013-03-15 17:06:52
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noheart2179

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by noheart2179 at 2013-03-15 17:06:52
你是挑的菌落还是转的菌液?菌落/菌液是新鲜长出来的,还是放了很久的了?

这些都有可能是造成你的菌液这么长时间没长起来的原因之一。
如果有来生,请与我擦肩而过
4楼2013-03-15 17:07:47
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by noheart2179 at 2013-03-15 17:06:52
你是挑的菌落还是转的菌液?菌落/菌液是新鲜长出来的,还是放了很久的了?

我是挑的菌落,新长的。现在情况有了一点好转,大约十七八个小时能变混浊,但是OD值还不是很高,不知道为什么?
5楼2013-03-17 10:13:34
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noheart2179

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jiapingshk at 2013-03-17 10:13:34
我是挑的菌落,新长的。现在情况有了一点好转,大约十七八个小时能变混浊,但是OD值还不是很高,不知道为什么?...

BL21菌株有时是会出现这种情况的。请问你是打算摇菌做感受态,还是打算做表达?你挑的菌落是用冻菌划线的,还是用菌液划线的?如果用冻菌/菌液划线的是新鲜的,还是放置很久的了?问到这里你应该知道我要说的意思了。我只是提供潜在原因的一个推测给你,具体情况要看你到底是怎么做的。
如果有来生,请与我擦肩而过
6楼2013-03-17 11:20:14
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by noheart2179 at 2013-03-17 11:20:14
BL21菌株有时是会出现这种情况的。请问你是打算摇菌做感受态,还是打算做表达?你挑的菌落是用冻菌划线的,还是用菌液划线的?如果用冻菌/菌液划线的是新鲜的,还是放置很久的了?问到这里你应该知道我要说的意思了 ...

我是想做表达,菌应该是没有问题的,我刚用LB培养基做过相同的实验,菌长得很好,蛋白也表达了。我很担心是不是培养基出什么问题了
7楼2013-03-18 09:36:02
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stephenreal

至尊木虫 (著名写手)

我以前只做过一次,跟你的情况类似的,绝没有说到六小时就混浊。最小营养的培养基与LB培养基就理论上来说,细菌在其中的生长状况也是不一样的。按既往的情况和理论,你的情况应该是正常的。
8楼2013-03-18 11:03:13
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xie99900

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by stephenreal at 2013-03-18 11:03:13
我以前只做过一次,跟你的情况类似的,绝没有说到六小时就混浊。最小营养的培养基与LB培养基就理论上来说,细菌在其中的生长状况也是不一样的。按既往的情况和理论,你的情况应该是正常的。

请问用M9培养基接大肠杆菌的时候也是需要补加抗生素吗?

发自小木虫Android客户端
9楼2017-11-25 17:12:00
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xie99900

新虫 (初入文坛)

我也遇到了相同的情况,请问您最后是怎么解决的?谢谢

发自小木虫Android客户端
10楼2017-11-25 17:20:20
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