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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » M9培养基摇菌
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

[求助] M9培养基摇菌

为什么我的BL21在M9培养基中摇菌37度二十多小时，菌液才能变混浊？正常情况应该多长时间？
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1楼 2013-03-11 11:03:26
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jiapingshk: 金币+10, ★有帮助 2013-03-13 09:19:20
大肠杆菌在M9中的培养情况和在LB中培养时间区别不大，应该在6小时左右就已经非常浑浊了，20小时超出理解范围，我也不知道为什么了。
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2楼2013-03-11 14:37:04
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noheart2179

铁虫 (小有名气)
你是挑的菌落还是转的菌液？菌落／菌液是新鲜长出来的，还是放了很久的了？
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如果有来生，请与我擦肩而过
3楼2013-03-15 17:06:52
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noheart2179

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by noheart2179 at 2013-03-15 17:06:52
你是挑的菌落还是转的菌液？菌落／菌液是新鲜长出来的，还是放了很久的了？

这些都有可能是造成你的菌液这么长时间没长起来的原因之一。
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如果有来生，请与我擦肩而过
4楼2013-03-15 17:07:47
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by noheart2179 at 2013-03-15 17:06:52
你是挑的菌落还是转的菌液？菌落／菌液是新鲜长出来的，还是放了很久的了？

我是挑的菌落，新长的。现在情况有了一点好转，大约十七八个小时能变混浊，但是OD值还不是很高，不知道为什么？
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5楼2013-03-17 10:13:34
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noheart2179

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jiapingshk at 2013-03-17 10:13:34
我是挑的菌落，新长的。现在情况有了一点好转，大约十七八个小时能变混浊，但是OD值还不是很高，不知道为什么？...

BL21菌株有时是会出现这种情况的。请问你是打算摇菌做感受态，还是打算做表达？你挑的菌落是用冻菌划线的，还是用菌液划线的？如果用冻菌/菌液划线的是新鲜的，还是放置很久的了？问到这里你应该知道我要说的意思了。我只是提供潜在原因的一个推测给你，具体情况要看你到底是怎么做的。
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如果有来生，请与我擦肩而过
6楼2013-03-17 11:20:14
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by noheart2179 at 2013-03-17 11:20:14
BL21菌株有时是会出现这种情况的。请问你是打算摇菌做感受态，还是打算做表达？你挑的菌落是用冻菌划线的，还是用菌液划线的？如果用冻菌/菌液划线的是新鲜的，还是放置很久的了？问到这里你应该知道我要说的意思了 ...

我是想做表达，菌应该是没有问题的，我刚用LB培养基做过相同的实验，菌长得很好，蛋白也表达了。我很担心是不是培养基出什么问题了
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7楼2013-03-18 09:36:02
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stephenreal

至尊木虫 (职业作家)
我以前只做过一次，跟你的情况类似的，绝没有说到六小时就混浊。最小营养的培养基与LB培养基就理论上来说，细菌在其中的生长状况也是不一样的。按既往的情况和理论，你的情况应该是正常的。
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8楼2013-03-18 11:03:13
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xie99900

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by stephenreal at 2013-03-18 11:03:13
我以前只做过一次，跟你的情况类似的，绝没有说到六小时就混浊。最小营养的培养基与LB培养基就理论上来说，细菌在其中的生长状况也是不一样的。按既往的情况和理论，你的情况应该是正常的。

请问用M9培养基接大肠杆菌的时候也是需要补加抗生素吗？

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9楼2017-11-25 17:12:00
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xie99900

新虫 (初入文坛)
我也遇到了相同的情况，请问您最后是怎么解决的？谢谢

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10楼2017-11-25 17:20:20
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