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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 实时定量PCR之前做常规PCR，两者的反应程序是不是应该一样啊？
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追寻风轻扬

金虫 (小有名气)

[交流] 实时定量PCR之前做常规PCR，两者的反应程序是不是应该一样啊？ 已有2人参与

如题。这几天做常规PCR，内参引物扩增都有引物二聚体，今天想起来之前做荧光定量与常规PCR时的反应程序不一样，是不是统一一下比较好呢？常规pcr的是35个循环，荧光定量的是45个循环。
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幸福只道是寻常
1楼 2013-03-08 09:58:38
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pilicaizi

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-13 16:44:19
这个没必要程序一样的，定量之前做一步常规pcr是保证你的样品cDNA没有问题，因此不管扩增几个循环，只要能有你的目的片段扩出来就可以，关键是你做定量pcr的结果不能有引物二聚体，需要做一下溶解曲线
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愿得一人心，白首不相离
3楼2013-03-13 14:55:43
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lhs521521

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
也可以把荧光定量后的产物进行PCR！
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寻找真正的自我！
2楼2013-03-08 17:17:55
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