| 查看: 2543 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
凡凡高高高金虫 (小有名气)
|
[求助]
克隆拟南芥的基因，为什么每次测序结果出来都是比TAIR网站上标注的序列多出20个碱基呢
|
||
| 最近在做载体构建，但是在克隆上就出现了问题，使得实验难有进展，以cDNA做模板，为什么每次克隆出来的得基因序列都比TAIR网站上标注的序列多出20个碱基呢？是网站上的信息错误还是操作的原因？又该怎么应对这种情况呢？求大神指点 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有103人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 网站又出问题了?
已经有8人回复
- 测序公司送回来基因序列，怎么绘制树形发育图呢？
已经有3人回复
- 基因序列中的信号肽怎么分析出来并且去除掉
已经有7人回复
- 测序后发现碱基不一样了
已经有8人回复
- 关于测序结果碱基丢失
已经有15人回复
- 请问知道了基因，如何查它在水稻中的ID
已经有4人回复
- F测验不显著，还需要标注多重比较的结果吗？
已经有3人回复
- 怎么计算含有特定碱基序列的基因的含量
已经有4人回复
- 一个神奇的网站
已经有11人回复
- 测序结果显示连上了，但是序列不对，连上的序列数据库中找不到，怎么回事
已经有3人回复
- 如何查询拟南芥中一个已知功能基因在其它种中的已鉴定的同类基因
已经有6人回复
- 获得一段碱基序列，应该是个未知基因，如何确定起始密码子和终止密码子
已经有3人回复
- 拟南芥突变体纯合子目的基因仍有表达！真心求助！
已经有12人回复
- 求助拟南芥SALK突变体纯合体鉴定中的问题
已经有15人回复
- DNA提取时260/280比值为什么总是偏低？
已经有8人回复
- 特别急！！！用质谱法，然后能确定拟南芥里的哪些基因和位置，这是怎么做的啊！
已经有13人回复
- 测序结果出现单碱基的重叠峰
已经有6人回复
- 20碱基的DNA跑胶得多久？
已经有5人回复
- 关于克隆植物基因启动子序列？
已经有4人回复
- 双向测序序列拼接不起来
已经有8人回复
- 几条序列注释为同一个基因，但这几条序列却拼接不上，相似行也不高
已经有9人回复
- 如何鉴定一个拟南芥完全未知的基因的功能
已经有10人回复
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
【答案】应助回帖
|
嗯............... 问下楼主的cDNA合成时用的OligodT还是OligodT和Random Hexamers混合方式？我以前采用后一种cDNA合成方式，扩一个较长的基因（大概3.5Kb）时就出现了融合有4bp的内含子序列（其他均正确），当初分析的就是没有用DNaseI处理RNA，导致gDNA微量存在，使扩增过程出现错误。因为实验过程嫌DNaseI处理会损失RNA我就没有做，其实这点很必要的。Random Hexamer是无节操性结合的引物，所以产生这种融合现象并不奇怪。 楼上各位说的variant也是可能的。TAIR并不是唯一。 所以嘛，和PCR有关的实验怪异现象，非常之多，因为PCR本身就是一个神奇的技术~（笑） 个人看法，若有说错请高手指点 |
9楼2013-08-23 19:44:45
2楼2013-02-22 12:41:02
凡凡高高高
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2696.3
- 帖子: 174
- 在线: 104.3小时
- 虫号: 1305313
- 注册: 2011-05-24
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
3楼2013-02-22 17:40:56
4楼2013-02-23 10:47:40
20