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[求助]
求助拟南芥SALK突变体纯合体鉴定中的问题
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我在鉴定SALK突变体纯合体过程中，发现以野生型的DNA为模板用LBb1+RP引物进行PCR的时候也能扩出同T-DNA插入突变体中相大小的条带，请教哪位高手给分析一下，为什么会这样，怎么解决此类问题？ 附件中的图为其中一次得结果，我分别用了三次提的Col DNA，结果都是一样的，请教高手解答，谢谢！  2013.8.28.jpg |
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你可以上这个网站http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html，在搜索框中输入你的T-DNA号，如salk_012345，搜索以后直接会给出LP 和RP的引物，这个引物网站设计好的，你检测T-DNA条带不管插入方向如何，只需要用RP+LBb1扩就可以了，一般网站设计的基因条带大小都为1000左右，T-DNA条带肯定小于基因条带。网站的LB不需要反向互补，可以直接可以用。 |
11楼2014-12-16 20:17:02
8楼2013-10-29 17:06:34
十比
木虫 (著名写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 3209.9
- 散金: 1125
- 红花: 5
- 帖子: 1204
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- 虫号: 221737
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- 专业: 植物学研究的新技术、新方
2楼2013-08-30 08:34:33
3楼2013-08-31 09:08:12
4楼2013-09-01 08:48:23
5楼2013-09-01 22:40:32
6楼2013-09-03 16:18:14
7楼2013-09-03 19:55:10
9楼2014-12-16 09:31:26
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你可以上这个网站http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html，在搜索框中输入你的T-DNA号，如salk_012345，搜索以后直接会给出LP 和RP的引物，这个引物网站设计好的，你检测T-DNA条带不管插入方向如何，只需要用RP+LBb1扩就可以了，一般网站设计的基因条带大小都为1000左右，T-DNA条带肯定小于基因条带。网站的LB不需要反向互补，可以直接可以用。 |
10楼2014-12-16 20:15:33
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