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求助拟南芥SALK突变体纯合体鉴定中的问题
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我在鉴定SALK突变体纯合体过程中,发现以野生型的DNA为模板用LBb1+RP引物进行PCR的时候也能扩出同T-DNA插入突变体中相大小的条带,请教哪位高手给分析一下,为什么会这样,怎么解决此类问题? 附件中的图为其中一次得结果,我分别用了三次提的Col DNA,结果都是一样的,请教高手解答,谢谢! 2013.8.28.jpg |
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你可以上这个网站http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html,在搜索框中输入你的T-DNA号,如salk_012345,搜索以后直接会给出LP 和RP的引物,这个引物网站设计好的,你检测T-DNA条带不管插入方向如何,只需要用RP+LBb1扩就可以了,一般网站设计的基因条带大小都为1000左右,T-DNA条带肯定小于基因条带。网站的LB不需要反向互补,可以直接可以用。 |

11楼2014-12-16 20:17:02
十比
木虫 (著名写手)
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2楼2013-08-30 08:34:33

3楼2013-08-31 09:08:12
4楼2013-09-01 08:48:23







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