应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 求助拟南芥SALK突变体纯合体鉴定中的问题
51/1返回列表
查看: 4966  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zb0806030

银虫 (小有名气)

[求助] 求助拟南芥SALK突变体纯合体鉴定中的问题

我在鉴定SALK突变体纯合体过程中，发现以野生型的DNA为模板用LBb1+RP引物进行PCR的时候也能扩出同T-DNA插入突变体中相大小的条带，请教哪位高手给分析一下，为什么会这样，怎么解决此类问题？
    附件中的图为其中一次得结果，我分别用了三次提的Col DNA，结果都是一样的，请教高手解答，谢谢！
求助拟南芥SALK突变体纯合体鉴定中的问题
2013.8.28.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
厚积薄发
1楼 2013-08-28 21:34:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zb0806030

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 科技广场 at 2013-09-03 16:18:14
你好，你的LBb1+rp条带多大？

从marker的位置看是位于250到500bp的条带之间，我的marker是takara的250bp marker，最亮的一条带是1000，下面依次是750、500、250、100.可能由于我截图的原因，250bp的条带看的不是很清楚。
赞一下 回复此楼
厚积薄发
7楼2013-09-03 19:55:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

十比

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zb0806030: 金币+2, ★有帮助 2013-08-31 10:46:52
个人觉得是污染，PCR太灵敏，从图看明显可能是野生型的样品条带明显弱。
赞一下 回复此楼
2楼2013-08-30 08:34:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zb0806030

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 十比 at 2013-08-30 08:34:33
个人觉得是污染，PCR太灵敏，从图看明显可能是野生型的样品条带明显弱。

谢谢你的回复，我再做PCR的时候做一个对照吧，看看是不是引物污染了，再次感谢！
赞一下 回复此楼
厚积薄发
3楼2013-08-31 09:08:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小杰4444

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你这个明显不是LB1+RP的条带大小啊，不是目的条带！改变退火温度再试试吧。
赞一下 回复此楼
4楼2013-09-01 08:48:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭