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monkey-run

新虫 (初入文坛)

[求助] 定点突变问题

Sample TextSample Text
定点突变,测序结果是,我要突变的位点突变成功,但是在另一个位点也出现了突变,A突变成了C。。而且这个位点不在引物的范围内,我送的十个样,都是这样的情况,求助,这是什么原因呢?
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yuejiansu

新虫 (初入文坛)

最近想做基因沉默,也就是RNA干扰,因为做的是真菌的,实验室师兄师姐也没做过,不知道要用什么载体,怎么构建成干扰载体,不知道哪位晓得。
3楼2013-06-25 19:27:37
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 鼓励发帖交流问题。 2013-01-22 20:39:24
有可能模板本身突变了。这个A→C的突变是沉默突变吗?当然最大的可能还是PCR时候出错了。如果很多克隆都是这样,说明错配发生在PCR早期,运气不好吧。如果这个序列不可用的话只能重做了。
2楼2013-01-22 16:01:01
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