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DNA甲基化实验中的疑惑 已有1人参与
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最近一直在做种子的甲基化,从种子胚中提取的DNA,质量和浓度都还不错,260/280和260/230均在1.9-2.0之间,浓度2000μg/L,酶切用的是ECORI和HPAII(快酶),连接、预扩、选扩,效果一直不是很满意,聚丙烯酰胺凝胶电泳的效果不是很好,时而可以跑出条带,时而弥散一片。 有几个问题:1、酶切后用不用纯化,如果不纯化,连接接头的时候容易吗?连接后如何检测是否连接上了?2、有没有做过DNA甲基化分析的高手(MSAP),求各个步骤的体系?3、在这个实验过程中,最经常出现的问题是什么? 先谢谢各位高手了 |
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