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tanfeng198

铜虫 (小有名气)

[交流] DNA甲基化检测技术 已有9人参与

本人做DNA甲基化研究，想请教做甲基化敏感酶酶切southern检测时 一些转座子的序列经常有同源序列，设计探针时需要注意哪些方面？
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john198197

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1楼 2012-04-27 18:24:45
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们测定DNA甲基修饰做是用重亚硫酸盐测序方法测定。DNA甲基修饰，应该也可以直接用质谱测定甲基化修饰。
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2楼2012-04-27 22:43:52
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ADTechnology

捐助贵宾 (著名写手)

表观遗传学专业供应商
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不是你是进行定性分析呢，还是定量检测呢？我们有专门针对DNA甲基化定量检测的试剂盒（荧光法），更多内容请参考如下链接：http://www.aderr.com/cn/main.php ... dle\" border=\"0\">
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3楼2012-05-01 16:19:48
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mareone

铁虫 (小有名气)
★
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NADH是线粒体呼吸链中能量产生的控制标记物。NADH 氧化还原状态对细胞内氧水平和组织内能量消耗非常敏感。MitoViewer线粒体观测仪能够提供由NADH荧光评价的活体细胞实时线粒体运转信息。可以用于组织含氧量，大脑皮质传播抑制，药物代谢变化，药品安全和效率监测等多种研究需要。如果你想进一步了解，请给我写email :yanming@nbl.com.cn
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欲善其工，必利其器。
4楼2012-05-03 15:37:23
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john198197

至尊木虫 (著名写手)
★
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送鲜花一朵
我初次做甲基化的，还请大家多指点，为此，特咨询下，在修饰后DNA用于PCR的PCR反应体系：（缓冲液，dNTP,
甲基化上下游引物和去甲基化上下游引物(这两者是同时混在体系里吗)，修饰后DNA模板，Taq酶和水。）--一个PCR完整体系。
问题就是：体系中的引物问题，甲基化上下游引物和去甲基化上下游引物都同时在吗？就是P时，都同时在一个体系中用吗？
谢谢！
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5楼2012-09-03 15:33:32
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hbbeijibing

新虫 (小有名气)
★
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2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-27 22:43:52
我们测定DNA甲基修饰做是用重亚硫酸盐测序方法测定。DNA甲基修饰，应该也可以直接用质谱测定甲基化修饰。

我也即将用这个方法测甲基化，能否请教一下这位大侠，它每一步加的那些试剂都有什么作用呢？谢谢！
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6楼2013-05-21 11:56:33
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sarah-miao

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
关于甲基化检测的试验你们做得顺利么？
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7楼2013-05-27 14:17:04
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tanfeng198

铜虫 (小有名气)
化学水解感觉对碱基有破坏，高氯酸过量会导致5mC含量降低很多，正准备做酶解法
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8楼2013-05-29 00:02:20
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lll8120

新虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-27 22:43:52
我们测定DNA甲基修饰做是用重亚硫酸盐测序方法测定。DNA甲基修饰，应该也可以直接用质谱测定甲基化修饰。

您好！我做的是BSP，克隆测序的片段出现了碱基缺失，是什么原因造成的？有没有什么好的建议？
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我思故我在
9楼2014-11-27 09:37:32
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键盘上的脚丫

金虫 (小有名气)
★
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9楼: Originally posted by lll8120 at 2014-11-27 09:37:32
您好！我做的是BSP，克隆测序的片段出现了碱基缺失，是什么原因造成的？有没有什么好的建议？...

您好，您现在还在做MSAP吗？我有些许不懂得，想请教一下，主要还是引物设计的问题。
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10楼2015-02-12 10:50:54
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