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tanfeng198

铜虫 (小有名气)

[交流] DNA甲基化检测技术 已有9人参与

本人做DNA甲基化研究,想请教做甲基化敏感酶酶切southern检测时 一些转座子的序列经常有同源序列,设计探针时需要注意哪些方面?
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)


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我们测定DNA甲基修饰做是用重亚硫酸盐测序方法测定。DNA甲基修饰,应该也可以直接用质谱测定甲基化修饰。
2楼2012-04-27 22:43:52
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ADTechnology

捐助贵宾 (著名写手)

表观遗传学专业供应商



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不是你是进行定性分析呢,还是定量检测呢?我们有专门针对DNA甲基化定量检测的试剂盒(荧光法),更多内容请参考如下链接:http://www.aderr.com/cn/main.php ... dle\" border=\"0\">
3楼2012-05-01 16:19:48
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mareone

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
NADH是线粒体呼吸链中能量产生的控制标记物。NADH 氧化还原状态对细胞内氧水平和组织内能量消耗非常敏感。MitoViewer线粒体观测仪能够提供由NADH荧光评价的活体细胞实时线粒体运转信息。可以用于组织含氧量,大脑皮质传播抑制,药物代谢变化,药品安全和效率监测等多种研究需要。如果你想进一步了解,请给我写email :yanming@nbl.com.cn
欲善其工,必利其器。
4楼2012-05-03 15:37:23
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john198197

至尊木虫 (著名写手)


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送鲜花一朵
我初次做甲基化的,还请大家多指点,为此,特咨询下,在修饰后DNA用于PCR的PCR反应体系:(缓冲液,dNTP,
甲基化上下游引物和去甲基化上下游引物(这两者是同时混在体系里吗),修饰后DNA模板,Taq酶和水。)--一个PCR完整体系。
问题就是:体系中的引物问题,甲基化上下游引物和去甲基化上下游引物都同时在吗?就是P时,都同时在一个体系中用吗?
谢谢!
5楼2012-09-03 15:33:32
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hbbeijibing

新虫 (小有名气)


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引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-27 22:43:52
我们测定DNA甲基修饰做是用重亚硫酸盐测序方法测定。DNA甲基修饰,应该也可以直接用质谱测定甲基化修饰。

我也即将用这个方法测甲基化,能否请教一下这位大侠,它每一步加的那些试剂都有什么作用呢?谢谢!
6楼2013-05-21 11:56:33
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sarah-miao

银虫 (正式写手)


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关于甲基化检测的试验你们做得顺利么?
7楼2013-05-27 14:17:04
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tanfeng198

铜虫 (小有名气)

化学水解感觉对碱基有破坏,高氯酸过量会导致5mC含量降低很多,正准备做酶解法
8楼2013-05-29 00:02:20
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lll8120

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
2楼: Originally posted by 凌波丽 at 2012-04-27 22:43:52
我们测定DNA甲基修饰做是用重亚硫酸盐测序方法测定。DNA甲基修饰,应该也可以直接用质谱测定甲基化修饰。

您好!我做的是BSP,克隆测序的片段出现了碱基缺失,是什么原因造成的?有没有什么好的建议?
我思故我在
9楼2014-11-27 09:37:32
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键盘上的脚丫

金虫 (小有名气)


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引用回帖:
9楼: Originally posted by lll8120 at 2014-11-27 09:37:32
您好!我做的是BSP,克隆测序的片段出现了碱基缺失,是什么原因造成的?有没有什么好的建议?...

您好,您现在还在做MSAP吗?我有些许不懂得,想请教一下,主要还是引物设计的问题。
10楼2015-02-12 10:50:54
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