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1985228

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 63.4
帖子: 67
在线: 70.8小时
虫号: 972669

[交流] 有经验的虫友帮我分析下两次western blot 的结果吧，望指点

最近做western blot，抗体买的是博士德公司的一抗和二抗，实验条件转膜之后5%脱脂奶粉室温封闭2h，TBST 5min洗膜一次后；1:150 稀释一抗4度封闭过夜，TBST 洗膜5min，3次；1:3000孵育二抗，TBST 洗膜5min，3次后，ECL曝光拍照。补充：我的膜是NC膜，另外第一次买的一抗说明书上没有写含叠氮化钠；第二次买的时候一抗中含叠氮化钠
第一次的结果如下，有两条带，上面的是目的蛋白，下面比较亮的是内参肌动蛋白
但第二次用同样的抗体，只是不同批次的，买的新抗体，内参基因的条带就非常的淡
请多指点，我现在做了几次试验了，从蛋白也重新提取的

第二次试验结果.jpg

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1楼 2013-01-17 11:57:14

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piaoying_jys

木虫 (著名写手)

应助: 3 (幼儿园)
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虫号: 2018093

★
1985228(金币+1): 谢谢参与

高手啊

6楼2013-01-17 12:57:37

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