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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » trizol 提RNA，DNA酶的问题
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新虫 (小有名气)

[交流] trizol 提RNA，DNA酶的问题 已有7人参与

trizol 提RNA。在反转录之前加DNA酶消化DNA,对反转录有很大影响。
在提取RNA过程中加DNA酶可以吗，在加入trizol 液之后顺便加DNA酶，加入氯仿后DNA酶随蛋白一起沉降。
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1楼 2013-01-17 10:26:38
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
你可以试试，不过我认为trizol里面有酚，会使蛋白变性的。
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2楼2013-01-17 10:33:32
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lma223

铜虫 (正式写手)
★
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DNase treatment对反转录不会有多大影响，你需要加DNase inhibitor 将DNase沉降或者直接过RNA column会去除掉Dnase。
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知行合一，致良知！
3楼2013-01-17 13:12:34
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cdl007

木虫 (正式写手)
★
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所有的酶在trizol里都无效，trizol是强变性剂，加了trizol再顺便加啥都是浪费
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4楼2013-01-17 15:28:36
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dayulee

木虫 (正式写手)

愚木虫
★
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楼主肯定是贪多了，你使用trizol提取液，只需要100毫克组织的量就可以提取到足够的RNA了，而且只要是在这个范围内你基本上不用考虑DNA的污染问题。如果是要用DNA酶处理，你必须也要把DNA酶处理掉，因为后续反转录生成了cDNA.
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好好学习，天天向上
5楼2013-01-17 17:06:27
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chlorella409

木虫 (正式写手)
★
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trizol里面有成分起到蛋白变性的作用，不然和蛋白结合的RNA怎么提取，你在提取过程中加DNase的话就会全被变性掉的
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6楼2013-01-17 17:08:36
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yuhan131481

铁虫 (小有名气)
★
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在Trizol中肯定变性失活啊  要不RNA酶早把RNA降解了
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7楼2013-01-19 22:05:21
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fdjr

金虫 (著名写手)
所有的酶在trizol里都无效，因为酶的缘故…

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2013-01-19 23:44:16
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