24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wxl.1989822

金虫 (小有名气)

应助: 13 (小学生)
金币: 445.9
红花: 15
帖子: 134
在线: 63.9小时
虫号: 2103782
注册: 2012-11-03
性别: GG
专业: 免疫生物学

[求助] pET28a与目的基因连接后转化长满菌

RT
用的BamHI和XhoI双切目的基因和pET28a转化涂布于KANA板上过夜后板上张了一层白色的东西貌似是菌但也不可能转化效率那么高啊张满了另外比较诡异的是在那一层白色的东西上面还有几个单菌落，请问大神这是肿么回事？

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

pET28a载体和目的基因已经有9人回复
PCR 连接转化不长菌已经有7人回复
转化真菌后，怎么鉴定转化子？目的基因是从该真菌克隆出来的已经有5人回复
pMD18-T载体与目的基因连接后构建的质粒能通过接合转移到一些难以转化的细菌中吗？已经有8人回复
请问用Vector NTI如何实现在pET28a中加入目的基因片段的谱图绘制。已经有10人回复
构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上已经有54人回复
目的基因连接pGEX-6p-1进行转化的问题已经有14人回复
胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题已经有8人回复
克隆基因和载体连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？已经有17人回复
【求助/交流】目的基因与pPIC9K连接的问题！已经有9人回复
【求助/交流】质粒跟目的基因连接不上怎么办已经有17人回复
【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？已经有20人回复
【求助/交流】（引物设计）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影响目的基因的表达？已经有9人回复
【求助/交流】目的基因连接表达载体后涂板不长菌已经有11人回复

1楼 2013-01-13 14:26:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

应助: 12 (小学生)
金币: 764
红花: 2
帖子: 351
在线: 16.7小时
虫号: 1114575
注册: 2010-10-05
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-01-15 11:55:10

1.抗生素失效
2.质粒污染
3.感受态效率过高

解决方案建议
1.更换新配制的抗生素液体
2.检验质粒是否拿错或容器是否被其他质粒污染
3.。。。。。这个，你用卡娜抗性的质粒1ul快转看看能不能长，如果长了100个左右效率就还可以，这样的话那些小菌也许就是目的菌。至于那些大的菌姑且认为是污染吧。。。。

话说楼主这样的情况我只有在AMP抗性遇到过类似样的平板，卡娜的真心没啥奇怪平板啊。。。建议做转化的房间用紫外灯照照消毒一下