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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pET28a与目的基因连接后转化长满菌
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wxl.1989822

金虫 (小有名气)

[求助] pET28a与目的基因连接后转化长满菌

RT
用的BamHI和XhoI双切目的基因和pET28a转化涂布于KANA板上 过夜后 板上张了一层白色的东西 貌似是菌 但也不可能转化效率那么高啊 张满了 另外比较诡异的是 在那一层白色的东西上面还有几个单菌落，请问大神这是肿么回事？
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1楼 2013-01-13 14:26:36
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hard_bull

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
挑单克隆抽质粒电泳试一试，也就一晚上加一上午的时间，看看条带对不对。估计是长杂菌了
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没有做不出来的课题，只有没有思考的大脑
4楼2013-01-13 18:39:13
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酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是你的ka抗性失效了，（如：倒平板时加ka时温度太高，ka浓度太低等）
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2楼2013-01-13 16:22:59
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wxl.1989822

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 酶切专家 at 2013-01-13 16:22:59
可能是你的ka抗性失效了，（如：倒平板时加ka时温度太高，ka浓度太低等）

没有 我特意试过KANA没有失效
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3楼2013-01-13 17:56:22
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灰血动物

金虫 (小有名气)
有可能就是电转效率太高，建议孵育后稀释涂布

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2013-01-14 00:49:37
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