应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pET28a与目的基因连接后转化长满菌
101/1返回列表
查看: 2805  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wxl.1989822

金虫 (小有名气)

[求助] pET28a与目的基因连接后转化长满菌

RT
用的BamHI和XhoI双切目的基因和pET28a转化涂布于KANA板上 过夜后 板上张了一层白色的东西 貌似是菌 但也不可能转化效率那么高啊 张满了 另外比较诡异的是 在那一层白色的东西上面还有几个单菌落，请问大神这是肿么回事？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-13 14:26:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是你的ka抗性失效了，（如：倒平板时加ka时温度太高，ka浓度太低等）
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-13 16:22:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxl.1989822

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 酶切专家 at 2013-01-13 16:22:59
可能是你的ka抗性失效了，（如：倒平板时加ka时温度太高，ka浓度太低等）

没有 我特意试过KANA没有失效
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-13 17:56:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hard_bull

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
挑单克隆抽质粒电泳试一试，也就一晚上加一上午的时间，看看条带对不对。估计是长杂菌了
赞一下 回复此楼
没有做不出来的课题，只有没有思考的大脑
4楼2013-01-13 18:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

灰血动物

金虫 (小有名气)
有可能就是电转效率太高，建议孵育后稀释涂布

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
未完成
5楼2013-01-14 00:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会感受态污染了？是否做了没加DNA的卡那板的负对照？
赞一下 回复此楼
6楼2013-01-14 03:15:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你涂了多少菌？一般我们都涂10，,90ul. 如果没出来，再把剩下的菌全图上
赞一下 回复此楼
shine
7楼2013-01-14 09:01:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逆天打酱油

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-01-15 11:55:10
1.抗生素失效
2.质粒污染
3.感受态效率过高

解决方案建议
1.更换新配制的抗生素液体
2.检验质粒是否拿错或容器是否被其他质粒污染
3.。。。。。这个，你用卡娜抗性的质粒1ul快转看看能不能长，如果长了100个左右效率就还可以，这样的话那些小菌也许就是目的菌。至于那些大的菌姑且认为是污染吧。。。。

话说楼主这样的情况我只有在AMP抗性遇到过类似样的平板，卡娜的真心没啥奇怪平板啊。。。建议做转化的房间用紫外灯照照消毒一下
祝实验顺利
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2013-01-15 10:35:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Renavatio

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
长一层白色的菌我也遇见过，不过我的是Tet抗性，我检测过  只有长出来的那种很明显的克隆才是阳性的，那一层我觉得是板上的抗生素部分失效或者是倒板的时候抗生素含量加少了
赞一下 回复此楼
Undefined！
9楼2013-01-15 20:38:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

新标签页

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果你确定kana没问题的话，那一定是染菌了，看看你的超净台空气过滤装置是否完善，培养箱是否有其他菌种污染。
赞一下 回复此楼
10楼2013-03-04 21:31:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wxl.1989822 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭