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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE 同工酶电泳必须要复性吗？
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依陌影

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE 同工酶电泳必须要复性吗？

如题，做POD同工酶变性凝胶电泳，7.5％分离胶，10％浓缩胶，没有复性，染色（醋酸联苯胺）后，一片白色（如图），用相机拍的，1100万像素，请帮忙分析原因？还有几个其他问题求助：
1、电泳上样液可以保存多久
2、电极缓冲液有大量泡沫（买的99％的SDS没有纯化）
3、不拿琼脂封底，直接灌胶，可以吗
4、电泳应该稳压还是稳流，应该多少伏（安）
5、用数码相机照相可以吗
6、所有试剂都是蒸馏水配的可以吗

IMG_1220_副本.JPG
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1楼 2013-01-02 23:52:29
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竹林里的小蛇

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
依陌影: 金币+1, ★有帮助, 曲拉通复性之后做出来了，谢谢 2013-01-05 14:00:35
我来回答你的问题。
1.电泳上样缓冲液4℃可以长期保存。
2.最好是减少泡沫的存在
3.直接灌胶是可以的，bio-rad的制胶器都不用封底。
4.恒流或恒压都是可以的，无明显区别，电流是20---30mA，电压80v-100v吧（不是很清楚，因为我习惯于恒流跑）。
5.数码相机是可以的，但一定要用白板做底，最好白板下有灯光。其实如果有凝胶成像仪更好，更方便。
6.蒸馏水勉强可以，但最好能用miniQ水。
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3楼2013-01-03 11:12:04
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初生之牛犊

新虫 (初入文坛)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与，但是非应助 2013-01-03 08:51:08
眼睛能到的相机就能看到，所以相机拍照没问题的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-01-03 08:41:33
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