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依陌影

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE 同工酶电泳必须要复性吗?

如题,做POD同工酶变性凝胶电泳,7.5%分离胶,10%浓缩胶,没有复性,染色(醋酸联苯胺)后,一片白色(如图),用相机拍的,1100万像素,请帮忙分析原因?还有几个其他问题求助:
1、电泳上样液可以保存多久
2、电极缓冲液有大量泡沫(买的99%的SDS没有纯化)
3、不拿琼脂封底,直接灌胶,可以吗
4、电泳应该稳压还是稳流,应该多少伏(安)
5、用数码相机照相可以吗
6、所有试剂都是蒸馏水配的可以吗

IMG_1220_副本.JPG
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初生之牛犊

新虫 (初入文坛)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与,但是非应助 2013-01-03 08:51:08
眼睛能到的相机就能看到,所以相机拍照没问题的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-01-03 08:41:33
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竹林里的小蛇

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
依陌影: 金币+1, 有帮助, 曲拉通复性之后做出来了,谢谢 2013-01-05 14:00:35
我来回答你的问题。
1.电泳上样缓冲液4℃可以长期保存。
2.最好是减少泡沫的存在
3.直接灌胶是可以的,bio-rad的制胶器都不用封底。
4.恒流或恒压都是可以的,无明显区别,电流是20---30mA,电压80v-100v吧(不是很清楚,因为我习惯于恒流跑)。
5.数码相机是可以的,但一定要用白板做底,最好白板下有灯光。其实如果有凝胶成像仪更好,更方便。
6.蒸馏水勉强可以,但最好能用miniQ水。
3楼2013-01-03 11:12:04
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