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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 请高手解决MDA测定问题
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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 请高手解决MDA测定问题

MDA这个指标我测了好多次了，每次都是现象很明显，高浓度的颜色越来越深，数据也挺规律，高浓度的吸光度越来越大，但要测三个波长下的吸光度，没个都增大最后按公式算出来就没规律了，怎么办？
我具体是这么测的，取0.2g叶子加2ml10%TCA研磨，然后10000g离心，去1.5ml上清+1.5ml0.6%TBA，然后沸水浴15min（每次水浴完现象都很明显，高浓度颜色越来越深），迅速冷却，10000g离心然后测OD450，OD532，OD600，测定的时候每个波长下的吸光度也都是随着浓度的增加而增加，最后算的时候是按这个公式：MDA浓度C (umol/L)=6.45(OD532-OD600)-0.56OD450
然后问题就来了，算完后就没趋势了，因为OD532是随浓度逐渐增大的，OD450,OD600也是，那么减来减去的最后趋势就没了，我该怎么办？这个方法有问题吗？我看了几篇外文文献都没有减OD450，都只测OD532和OD600，对吗？大家测MDA按什么方法来，趋势怎么样？
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
1楼 2012-12-26 22:27:09
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qingshuiyu12

新虫 (初入文坛)
我们用的是参照林植芳的方法，用0.1%TCA研磨的
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5楼2014-06-20 11:41:43
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a71840584

金虫 (正式写手)
按理说MDA趋势应该是曾大的吧？我的SOD趋势是增大，POD也是，脯氨酸也是，O2-也是，CAT是减少，按这些酶的趋势来推算MDA应该是增大的吧？
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
2楼2012-12-26 22:28:37
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a71840584

金虫 (正式写手)
还有根据这个方法能算出来可溶性糖的含量嘛？好像OD450波长下的吸光度就是可溶性糖的吧？
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
3楼2012-12-26 22:30:20
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bestripple

新虫 (初入文坛)
三氯乙酸的浓度降到5%，离心转速降到3krpm，10min试试
可溶性糖是625nm
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4楼2013-10-14 14:21:25
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