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请高手解决MDA测定问题
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MDA这个指标我测了好多次了，每次都是现象很明显，高浓度的颜色越来越深，数据也挺规律，高浓度的吸光度越来越大，但要测三个波长下的吸光度，没个都增大最后按公式算出来就没规律了，怎么办？ 我具体是这么测的，取0.2g叶子加2ml10%TCA研磨，然后10000g离心，去1.5ml上清+1.5ml0.6%TBA，然后沸水浴15min（每次水浴完现象都很明显，高浓度颜色越来越深），迅速冷却，10000g离心然后测OD450，OD532，OD600，测定的时候每个波长下的吸光度也都是随着浓度的增加而增加，最后算的时候是按这个公式：MDA浓度C (umol/L)=6.45(OD532-OD600)-0.56OD450 然后问题就来了，算完后就没趋势了，因为OD532是随浓度逐渐增大的，OD450,OD600也是，那么减来减去的最后趋势就没了，我该怎么办？这个方法有问题吗？我看了几篇外文文献都没有减OD450，都只测OD532和OD600，对吗？大家测MDA按什么方法来，趋势怎么样？ |
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