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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 请高手解决MDA测定问题

MDA这个指标我测了好多次了,每次都是现象很明显,高浓度的颜色越来越深,数据也挺规律,高浓度的吸光度越来越大,但要测三个波长下的吸光度,没个都增大最后按公式算出来就没规律了,怎么办?
我具体是这么测的,取0.2g叶子加2ml10%TCA研磨,然后10000g离心,去1.5ml上清+1.5ml0.6%TBA,然后沸水浴15min(每次水浴完现象都很明显,高浓度颜色越来越深),迅速冷却,10000g离心然后测OD450,OD532,OD600,测定的时候每个波长下的吸光度也都是随着浓度的增加而增加,最后算的时候是按这个公式:MDA浓度C (umol/L)=6.45(OD532-OD600)-0.56OD450
然后问题就来了,算完后就没趋势了,因为OD532是随浓度逐渐增大的,OD450,OD600也是,那么减来减去的最后趋势就没了,我该怎么办?这个方法有问题吗?我看了几篇外文文献都没有减OD450,都只测OD532和OD600,对吗?大家测MDA按什么方法来,趋势怎么样?
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
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a71840584

金虫 (正式写手)

还有根据这个方法能算出来可溶性糖的含量嘛?好像OD450波长下的吸光度就是可溶性糖的吧?
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
3楼2012-12-26 22:30:20
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a71840584

金虫 (正式写手)

按理说MDA趋势应该是曾大的吧?我的SOD趋势是增大,POD也是,脯氨酸也是,O2-也是,CAT是减少,按这些酶的趋势来推算MDA应该是增大的吧?
再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
2楼2012-12-26 22:28:37
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bestripple

新虫 (初入文坛)

三氯乙酸的浓度降到5%,离心转速降到3krpm,10min试试
可溶性糖是625nm
4楼2013-10-14 14:21:25
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qingshuiyu12

新虫 (初入文坛)

我们用的是参照林植芳的方法,用0.1%TCA研磨的
5楼2014-06-20 11:41:43
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