应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » 怎么分离抗体和与抗体连接好的材料
91/1返回列表
查看: 1530  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看

714850835

铁虫 (初入文坛)

[求助] 怎么分离抗体和与抗体连接好的材料

将抗体与我们制备的材料（~50nm）用的EDC和NHS连接，最后怎样才能把没连上抗体的洗掉，得到比较纯的连接物呢？ the free non-conjugated QDs and byproduct isourea were removed by ultrafiltration using 100 K Nanosep centrifugal devices by centrifugation at 5000 rmp for 15 min.The lower phase, contain-ing free QDs and isourea,  were discarded. To wash the conju-gate and reduce the impurities, the upper phase, containing QD-IgG, was diluted by 300  L PBS buffer, and additionally subjected to centrifugation at 5000 rmp for 15 min. This washing step was repeated twice. The conjugate was recovered by 100 L of PBS and transferred to a new Eppendorf tube and then stored at 4 °C in a dark until use. 实验刚起步，觉得ODs-lgG的大小跟ODs的差不多耶，因该混在一起吧，不理解文献中的方法。谢谢各位师兄师姐指点~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

科技

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-23 20:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

11jxli1

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2012-12-23 22:13:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

714850835

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 11jxli1 at 2012-12-23 22:13:13
采用专业的化学试剂可也分离

什么试剂呀?
回复此楼
3楼2012-12-24 07:51:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

abc5710110

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这个要看量子点的粒径大小和在溶液体系中的分散性如何了。
可以试试通过简单离心的方法，蛋白在溶液，4000~5000rpm的离心速度不容易离心下去，如果量子点能够离下去，就能分离开了，然后对离心物进行清洗几次，把结合不牢的洗去就OK了。
赞一下 回复此楼
强化多边交流，实现互利共赢
4楼2012-12-24 09:24:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

714850835

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by abc5710110 at 2012-12-24 09:24:00
这个要看量子点的粒径大小和在溶液体系中的分散性如何了。
可以试试通过简单离心的方法，蛋白在溶液，4000~5000rpm的离心速度不容易离心下去，如果量子点能够离下去，就能分离开了，然后对离心物进行清洗几次，把结 ...

谢谢啦^_^
QDs下去了，那么ODs-抗体的也会下去吧~这样怎么分离它们俩呢？
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-24 13:26:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

abc5710110

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 714850835 at 2012-12-24 13:26:42
谢谢啦^_^
QDs下去了，那么ODs-抗体的也会下去吧~这样怎么分离它们俩呢？...

额，如果比例合适的话，QDs表面基本上都标记了吧，不知道你还做不做封闭？
赞一下 回复此楼
强化多边交流，实现互利共赢
6楼2012-12-25 14:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

714850835

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by abc5710110 at 2012-12-25 14:20:39
额，如果比例合适的话，QDs表面基本上都标记了吧，不知道你还做不做封闭？...

我们不是用的QDs，是用的上转换连的是氨基，原理差不多嘛。不懂文献那种方法是怎么分离滴。
赞一下 回复此楼
7楼2012-12-26 19:21:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

abc5710110

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
714850835: 金币+10, 博学EPI+1, ★★★★★最佳答案 2012-12-27 10:22:39
他们进行了超滤分离， "the free non-conjugated QDs and byproduct isourea were removed by ultrafiltration using 100 K Nanosep centrifugal devices by centrifugation at 5000 rmp for 15 min"  也就是说用离心的方法，离心管是套式的（大离心管里面有小离心管，中间有滤膜的那种），这个跟做PCR之前的核酸提取方法差不多，标记好的QDs留在了上层里，free的滤到了下层（The lower phase, contain-ing free QDs and isourea,  were discarded.）。
赞一下 回复此楼
强化多边交流，实现互利共赢
8楼2012-12-27 10:05:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

714850835

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by abc5710110 at 2012-12-27 10:05:06
他们进行了超滤分离， "the free non-conjugated QDs and byproduct isourea were removed by ultrafiltration using 100 K Nanosep centrifugal devices by centrifugation at 5000 rmp for 15 min"  也 ...

谢谢啦！刚开始做实验还不知道这么高级的方法。
赞一下 回复此楼
9楼2012-12-27 10:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 714850835 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-16 22:26 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-16 21:26 by MHf40yA0Uhyb
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 17:12 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-16 17:00 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-16 16:27 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-16 07:12 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:51 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:24 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 04:51 by LH5NkK5Ud4bh
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:59 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:35 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-15 15:14 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:34 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭