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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助有关测定酶活性的问题
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叠瓣重华

木虫 (小有名气)

[求助] 求助有关测定酶活性的问题

本人比较小白，希望各位大神细心指导一下。我要用分光光度计测定一种酶的活性，比较不理解的是，多数这种实验都是用这种酶可以分解的物质做底物，然后加入酶反应一段时间之后，用未加入酶液的溶液做空白对照，那么加入酶的里面反应了之后不是会生成新的物质吗？这样跟没有反应的溶液做对照有意义吗？？希望尽快解答我好纠结。。。
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1楼2012-12-18 12:40:45
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叠瓣重华

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-18 14:08:51
不知道你纠结在哪里。这类测酶活的原理一般是酶促反应的底物或者新生成的物质在特定波长有特征吸收峰。通过比较未反应和反应后的吸光度来测定酶活的。

那就以底物有特定波长的吸收来说，我用做对比的空白比色皿里是没有反应的底物，测定的是底物已经和酶反应的比色皿，我纠结的是，测定的比色皿里底物生成的物质对于吸光度没有影响吗？不可能说底物在这个波长有特征吸收，但是生成的物质一点也没有吧谢谢啊~
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3楼2012-12-18 15:11:51
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你纠结在哪里。这类测酶活的原理一般是酶促反应的底物或者新生成的物质在特定波长有特征吸收峰。通过比较未反应和反应后的吸光度来测定酶活的。
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2楼2012-12-18 14:08:51
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
叠瓣重华: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢~ 2012-12-19 21:55:48
所谓特征吸收是指只有这种东西或者有其相同结构的物质才有的吸收峰。如果发生了化学反应，产物在同样的波长下一般是不会有吸收的。
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4楼2012-12-19 08:21:51
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