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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞应该如何裂解 已有5人参与

给细胞加了药 准备用HPLC测细胞内药物的含量。不知道应该如何裂解细胞
我们没有超声破碎仪。请问用做western的裂解液可以吗
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wolfman840

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看天: 金币+2, 多谢回答 2012-12-05 17:36:52
用注射水悬浮细胞后,置-80℃或者液氮中冻一夜,再取出,再冻,反复5次左右,细胞膜基本就破裂了。
3楼2012-12-05 08:35:32
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看天: 金币+2, 鼓励 常来 2012-12-05 17:37:00
要看你的HPLC柱子上什么buffer体系。含SDS的裂解液是不是太strong了。
2楼2012-12-05 08:04:05
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wolfman840 at 2012-12-05 08:35:32
用注射水悬浮细胞后,置-80℃或者液氮中冻一夜,再取出,再冻,反复5次左右,细胞膜基本就破裂了。

注射水?是什么水? 一般做这种实验 一个样品需要大概多少细胞? 总觉得细胞就那么一点点,再一裂解然后萃取什么的  肯定量很少
4楼2012-12-05 08:48:44
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jl860822

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看天: 金币+2, 鼓励 常来 2012-12-05 17:37:08
WB的裂解液应该不行吧,应该用柔和一点的裂解液
5楼2012-12-05 14:36:19
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