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西风瘦

银虫 (小有名气)


[交流] 液相条件没变,体系也没变,但是峰型和出峰时间都变了,怎么回事

近期在做肝微粒体体外反应,用液相检测,摸好了液相检测的条件,也用此条件做过几十个样品,做过几次谱图都是一样的,但是最近这次做完后,发现出峰时间都提前了,而且这次峰没有分开,不知道是为什么?又试了一次还是这样。。。
换了各种条件冲柱子冲了好久好久也还是这样……
反应条件,什么的都是跟以前一样的,为什么会有这么大的变化?难道是柱子出了问题?柱压也正常啊。。。
求有经验者赐教!!!
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西风瘦

银虫 (小有名气)


引用回帖:
5楼: Originally posted by 喵喵与咩咩 at 2012-12-03 22:37:19
每次做完实验我使用5%有机相先冲半小时,冲洗时间太短了,蛋白类物质本身就容易堵塞柱子,务必加预柱或者保护柱。有可能是柱子柱效下降了,反冲试试;也有可能系统哪里脏了,自己排查一下。

最近做的几批样品我没有加保护柱,但是这一次是突然提前的,并不是慢慢一次次提前的。系统脏了该怎么排查啊?
7楼2012-12-04 09:14:49
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userhung

禁虫 (文学泰斗)


2楼2012-12-03 20:51:11
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西风瘦

银虫 (小有名气)


一个峰提前了4分钟,一个提前了3分钟,流动相用的是乙腈和水,样品是经过蛋白沉淀高速离心过的。每次做完实验我使用5%有机相先冲半小时柱子再用95%有机相冲的。柱温恒定
3楼2012-12-03 21:03:26
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西风瘦

银虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by userhung at 2012-12-03 20:51:11
http://wenku.baidu.com/view/2907ce27ccbff121dd3683a1.html

什么意思?没领悟……
4楼2012-12-03 21:06:14
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