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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相条件没变，体系也没变，但是峰型和出峰时间都变了，怎么回事
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西风瘦

银虫 (小有名气)

[交流] 液相条件没变，体系也没变，但是峰型和出峰时间都变了，怎么回事

近期在做肝微粒体体外反应，用液相检测，摸好了液相检测的条件，也用此条件做过几十个样品，做过几次谱图都是一样的，但是最近这次做完后，发现出峰时间都提前了，而且这次峰没有分开，不知道是为什么？又试了一次还是这样。。。
换了各种条件冲柱子冲了好久好久也还是这样……
反应条件，什么的都是跟以前一样的，为什么会有这么大的变化？难道是柱子出了问题？柱压也正常啊。。。
求有经验者赐教！！！
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1楼 2012-12-03 20:36:39
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userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
西风瘦(金币+1): 谢谢参与
http://wenku.baidu.com/view/2907ce27ccbff121dd3683a1.html
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2楼2012-12-03 20:51:11
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西风瘦

银虫 (小有名气)
一个峰提前了4分钟，一个提前了3分钟，流动相用的是乙腈和水，样品是经过蛋白沉淀高速离心过的。每次做完实验我使用5%有机相先冲半小时柱子再用95%有机相冲的。柱温恒定
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3楼2012-12-03 21:03:26
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西风瘦

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by userhung at 2012-12-03 20:51:11
http://wenku.baidu.com/view/2907ce27ccbff121dd3683a1.html

什么意思？没领悟……
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4楼2012-12-03 21:06:14
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喵喵与咩咩

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
西风瘦(金币+1): 谢谢参与
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-12-04 09:24:52
每次做完实验我使用5%有机相先冲半小时,冲洗时间太短了，蛋白类物质本身就容易堵塞柱子，务必加预柱或者保护柱。有可能是柱子柱效下降了，反冲试试；也有可能系统哪里脏了，自己排查一下。
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5楼2012-12-03 22:37:19
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wm彼岸花

木虫 (正式写手)
★
西风瘦(金币+1): 谢谢参与
系统脏了吧
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6楼2012-12-04 08:10:42
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西风瘦

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 喵喵与咩咩 at 2012-12-03 22:37:19
每次做完实验我使用5%有机相先冲半小时,冲洗时间太短了，蛋白类物质本身就容易堵塞柱子，务必加预柱或者保护柱。有可能是柱子柱效下降了，反冲试试；也有可能系统哪里脏了，自己排查一下。

最近做的几批样品我没有加保护柱，但是这一次是突然提前的，并不是慢慢一次次提前的。系统脏了该怎么排查啊？
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7楼2012-12-04 09:14:49
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richbird

捐助贵宾 (著名写手)
★
西风瘦(金币+1): 谢谢参与
换跟柱子试试。
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8楼2012-12-04 15:48:52
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)
★
西风瘦(金币+1): 谢谢参与
柱效怎么个情况？使用的溶剂有没有改变？也遇到过……
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9楼2012-12-04 20:53:30
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笨学生

金虫 (正式写手)
★
西风瘦(金币+1): 谢谢参与
把柱子多洗一会儿，要不倒冲一会儿看看如何？
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10楼2012-12-04 23:50:49
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tongliwoai

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
西风瘦(金币+1): 谢谢参与
西风瘦: 金币+1 2012-12-05 09:14:05
是不是泵头堵了，尤其是水的

以前我也遇到过类似的状况，后来才发现水相的过滤头堵了，流动相极性变小了，出峰时间变短
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11楼2012-12-05 01:23:57
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leecius

铁杆木虫 (正式写手)
★
西风瘦(金币+1): 谢谢参与
是不是实验室的温度不稳定？这几天降温，可能会出现这种情况的。
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12楼2012-12-05 09:03:12
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西风瘦

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by tongliwoai at 2012-12-05 01:23:57
是不是泵头堵了，尤其是水的

以前我也遇到过类似的状况，后来才发现水相的过滤头堵了，流动相极性变小了，出峰时间变短

你说的太对了！就是你说的这个原因，昨天我超声洗了一下过滤头，就好了！非常感谢！困扰了我一个星期了都~~
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13楼2012-12-05 09:13:51
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功夫熊猫wzmc

新虫 (小有名气)
★
西风瘦(金币+1): 谢谢参与
看看柱子的柱效有没有降低（理论塔板数），如果理论塔板数降低大，那么就得考虑修复柱子了
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14楼2012-12-05 11:04:30
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tongliwoai

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by 西风瘦 at 2012-12-05 09:13:51
你说的太对了！就是你说的这个原因，昨天我超声洗了一下过滤头，就好了！非常感谢！困扰了我一个星期了都~~...

水相的滤头很容易堵，有的时候唱时间不用不给换水，温度高一点菌长得很快
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15楼2012-12-05 12:29:24
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液相宝宝

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用缓冲盐没？可能是通道被堵了，把通道彻底冲洗下。
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16楼2012-12-05 22:06:01
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kimsohie

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
……

[ Last edited by kimsohie on 2012-12-6 at 08:35 ]
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17楼2012-12-06 08:34:22
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tianya001

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
18楼2012-12-06 08:56:12
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