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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药典 » 液相一两分钟就出峰了 后面还没有峰~~~
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ouyangle

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相一两分钟就出峰了 后面还没有峰~~~

前段时间跑液相，安捷伦1200的  VWD检测器！如图二  有很多峰！
   这两天一跑，结果就不对了，重复了很多次都是这样的呀。如图一所示！就在一两分钟的时候出一个峰， 后面一点峰都没有啊！其他条件都是一样的。希望大家帮帮忙呀

图一



图二
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1楼 2012-06-26 12:29:00
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回帖置顶 ( 共有1个 )

jeangong

木虫之王 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-06-27 08:25:34
qinhy: PhEPI+1, 回答的不错，按照版规，授予EPI一枚 2012-06-27 15:02:36
1. 先排除是泵的问题，看看各个通道流速准不准
2. 前面一两分钟的像是溶剂峰，看看有没有uv吸收
3流动相是什么溶剂，最后用90%的乙腈或100%甲醇洗洗，看有没有东西出来
4. 图一的吸收值400，图二的吸收值50左右，建议把图一放大看看有没有峰！！
5 换一个强吸收的物质，如黄酮类化合物试试看，10－90%的甲醇或者乙腈洗脱，看出峰时间
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13楼2012-06-26 22:33:42
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普通回帖

zhweijun88

版主 (文坛精英)

化学化工区—领悟

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ouyangle: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-26 13:24:57
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-06-27 09:04:49
进一下别的物质看一看，是不是柱子出问题了
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你若不离不弃，我必生死相依，O(∩_∩)O
2楼2012-06-26 12:45:15
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ouyangle

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhweijun88 at 2012-06-26 12:45:15
进一下别的物质看一看，是不是柱子出问题了

我跑了好几个同类的样品了！ 都是这样的啊。要是柱子有问题了， 一般是怎么了？需要更换柱子吗？
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3楼2012-06-26 12:54:14
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zhweijun88

版主 (文坛精英)

化学化工区—领悟

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by ouyangle at 2012-06-26 12:54:14
我跑了好几个同类的样品了！ 都是这样的啊。要是柱子有问题了， 一般是怎么了？需要更换柱子吗？...

找根柱子换上看看什么情况吧，这种情况只能是柱子的问题，化合物直接冲出来了，柱子没起作用
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你若不离不弃，我必生死相依，O(∩_∩)O
4楼2012-06-26 13:01:54
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lanhui_yang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-06-27 09:05:00
用的啥柱子啊？应该是有东西强保留在柱子里了，好好冲冲柱子
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加油加油加油
5楼2012-06-26 13:05:18
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zigang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与！ 2012-06-27 09:05:08
换两个通道或者把流动相配在一个瓶里单通道试试，如果恢复正常，那可能泵有点不准了
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6楼2012-06-26 13:20:36
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ouyangle

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lanhui_yang at 2012-06-26 13:05:18
用的啥柱子啊？应该是有东西强保留在柱子里了，好好冲冲柱子

柱子的型号是Zorbax Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column
P/N 993967-902 /5063-6600      那我应该怎么冲洗柱子呢  直接用100%的甲醇冲洗么
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7楼2012-06-26 13:24:00
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ouyangle

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhweijun88 at 2012-06-26 13:01:54
找根柱子换上看看什么情况吧，这种情况只能是柱子的问题，化合物直接冲出来了，柱子没起作用...

嗯  我试试吧  谢谢
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8楼2012-06-26 13:24:33
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ouyangle

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zigang at 2012-06-26 13:20:36
换两个通道或者把流动相配在一个瓶里单通道试试，如果恢复正常，那可能泵有点不准了

这个和泵应该没有关系吧   就是样品进去以后没有保留  直接就下来了啊
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9楼2012-06-26 13:25:49
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lanhui_yang

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ouyangle at 2012-06-26 13:24:00
柱子的型号是Zorbax Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column
P/N 993967-902 /5063-6600      那我应该怎么冲洗柱子呢  直接用100%的甲醇冲洗么...

柱子之前走过缓冲盐没？可以先用甲醇：水=10:90冲洗30-60min再换纯甲醇，如果还不行可以换异丙醇（0.5流速），如果还不行就反冲一下吧
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加油加油加油
10楼2012-06-26 13:39:41
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