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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药典 » 液相一两分钟就出峰了 后面还没有峰~~~
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ouyangle

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相一两分钟就出峰了 后面还没有峰~~~

前段时间跑液相，安捷伦1200的  VWD检测器！如图二  有很多峰！
   这两天一跑，结果就不对了，重复了很多次都是这样的呀。如图一所示！就在一两分钟的时候出一个峰， 后面一点峰都没有啊！其他条件都是一样的。希望大家帮帮忙呀

图一



图二
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1楼2012-06-26 12:29:00
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ouyangle

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by zhweijun88 at 2012-06-26 12:45:15
进一下别的物质看一看，是不是柱子出问题了

我跑了好几个同类的样品了！ 都是这样的啊。要是柱子有问题了， 一般是怎么了？需要更换柱子吗？
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3楼2012-06-26 12:54:14
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ouyangle

新虫 (初入文坛)
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5楼: Originally posted by lanhui_yang at 2012-06-26 13:05:18
用的啥柱子啊？应该是有东西强保留在柱子里了，好好冲冲柱子

柱子的型号是Zorbax Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm, 5um column
P/N 993967-902 /5063-6600      那我应该怎么冲洗柱子呢  直接用100%的甲醇冲洗么
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7楼2012-06-26 13:24:00
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新虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by zhweijun88 at 2012-06-26 13:01:54
找根柱子换上看看什么情况吧，这种情况只能是柱子的问题，化合物直接冲出来了，柱子没起作用...

嗯  我试试吧  谢谢
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8楼2012-06-26 13:24:33
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6楼: Originally posted by zigang at 2012-06-26 13:20:36
换两个通道或者把流动相配在一个瓶里单通道试试，如果恢复正常，那可能泵有点不准了

这个和泵应该没有关系吧   就是样品进去以后没有保留  直接就下来了啊
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9楼2012-06-26 13:25:49
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ouyangle

新虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by lanhui_yang at 2012-06-26 13:39:41
柱子之前走过缓冲盐没？可以先用甲醇：水=10:90冲洗30-60min再换纯甲醇，如果还不行可以换异丙醇（0.5流速），如果还不行就反冲一下吧...

没有用缓冲溶液呀   回头我试试吧
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11楼2012-06-26 22:08:37
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13楼: Originally posted by jeangong at 2012-06-26 22:33:42
1. 先排除是泵的问题，看看各个通道流速准不准
2. 前面一两分钟的像是溶剂峰，看看有没有uv吸收
3流动相是什么溶剂，最后用90%的乙腈或100%甲醇洗洗，看有没有东西出来
4. 图一的吸收值400，图二的吸收值50左右， ...

流动相是甲醇啊   在280nm下没有吸收峰


图我都放大过一点峰都没有了啊

我跑了几个黄酮的、还跑了几个多酚的呢  都是这样的
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14楼2012-06-26 23:18:08
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新虫 (初入文坛)
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19楼: Originally posted by bamage at 2012-06-27 09:20:40
楼主把第一张图放大看看有没峰啊，没发现第一张图纵坐标很大吗？

已经放大看过了  没有任何的峰啊
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28楼2012-06-27 23:12:21
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新虫 (初入文坛)
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27楼: Originally posted by ahxalg3211 at 2012-06-27 14:29:32
我同意是柱子的问题，你有没有看压力与以前相比怎么样呢？

我也这么觉得啊  谢谢
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29楼2012-06-27 23:14:49
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新虫 (初入文坛)
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33楼: Originally posted by lixishan at 2012-06-29 13:26:22
我的情况也是，流动相用甲醇和水。可是一两分钟就出来了，后边一条直线没有峰。同学有说可能样品极性太大了不好分离

哦   那你现在做出来了没？
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34楼2012-06-29 20:10:26
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