24小时热门版块排行榜    

查看: 1684  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小城大宝

新虫 (初入文坛)

[求助] 5‘RACE巢式PCR 求指导

跑5“race 巢式PCR 跑完后有很多条带 大概有6条条带 没有特别亮的 请教各位下面我该怎么做 回收的话又不知道如何下手 苦恼 求前辈指导 是否我的巢式引物不好 还是有什么其他解决方法 十分感谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

用你的笑容去改变这个世界,别让这个世界改变了你的笑容。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小城大宝

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by apple712 at 2012-12-05 21:53:01
先问你两个问题:你的6个带size都差不多吗?你要克隆的这个基因是不是有很多个同源基因?一般情况下,遇到你这种情况,我的建议都回收进行测序。如果这几个带大小差不多,切起来有难度的话,可以一起切了回收,后面 ...

六个带大小还是有差异的,从1000多到200都有。是有很多同源基因的。谢谢你,我会回收看看的。十分感谢!祝一切顺利。
用你的笑容去改变这个世界,别让这个世界改变了你的笑容。
4楼2012-12-06 10:31:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

倾听世界0721

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

最保险的方法就是做个浓度大点的胶都回收了,电泳多跑一会儿。
引物就按RACE说明书上的要求设计行了。
2楼2012-12-05 20:44:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

apple712

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

先问你两个问题:你的6个带size都差不多吗?你要克隆的这个基因是不是有很多个同源基因?一般情况下,遇到你这种情况,我的建议都回收进行测序。如果这几个带大小差不多,切起来有难度的话,可以一起切了回收,后面连t-vector的时候多挑克隆。说不定你这个基因就是有很多同源的基因也不一定。
3楼2012-12-05 21:53:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小城大宝

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 倾听世界0721 at 2012-12-05 20:44:16
最保险的方法就是做个浓度大点的胶都回收了,电泳多跑一会儿。
引物就按RACE说明书上的要求设计行了。

谢谢你!我准备回收看看。祝顺利。
用你的笑容去改变这个世界,别让这个世界改变了你的笑容。
5楼2012-12-06 10:32:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 BnSlaJi8z5Vo 2026-08-17 3/150 2026-08-17 17:38 by CBFiACZS7HAK
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +4 angus9576 2026-08-17 8/400 2026-08-17 17:26 by angus9576
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 i7NFEVbjQMM5 2026-08-16 5/250 2026-08-17 16:38 by CBFiACZS7HAK
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 EWi2p09MOOv8 2026-08-16 3/150 2026-08-17 16:35 by CBFiACZS7HAK
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 13:49 by EYK67XJMj64E
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 i7NFEVbjQMM5 2026-08-16 4/200 2026-08-17 12:10 by 4GBAYCdVQoK3
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 11:46 by 4GBAYCdVQoK3
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 3/150 2026-08-17 09:49 by xLVPIRuSvCUe
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见