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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA琼脂糖凝胶电泳结果分析
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GloveJ

新虫 (小有名气)

[求助] DNA琼脂糖凝胶电泳结果分析

分子生物学菜鸟一个，现在在做摇菌提质粒（空质粒），电泳结果理解不了，请大侠们帮帮忙，小女子先在此谢谢了。
1.marker是10000的；
2.另外三个空加的是不同次提的同样的质粒，质粒大小是7500bp；
3.胶是新配的1%的，电泳液也是新配的，电压是80v。跑胶时间30mins；
问题：
1.怎么条带跑出来这么难看，连marker都是那么让人失望；
2.我提的质粒大小是7500bp，这个怎么跑出来比10000还大呢；
3.每个孔怎么跑出来多条带呢？

20121126晚上全部用新的跑pcdh.Tif(1.25MB)
http://kuai.xunlei.com/d/GDDUAQVUGUFU?p=130497
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依心而行，无憾今生
1楼 2012-11-28 09:51:59
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winner00lk

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你提出的不是你需要的质粒是可以肯定的，7500的质粒即使因为线性与超螺旋的区别也不会相差这么大，那么条带很有可能是基因组DNA了，因为基因组在提取质粒的时候是会被打碎的，所以随着跑胶时间的增加是可以看到多条带的；而且你的琼脂糖凝胶应该是配置时间较长，或者在没有完全溶解就开始泠凝导致胶块的密度不够均一，导致了你的marker条带很难看。
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我从远方来，没带走一丝遗憾
3楼2012-11-29 14:26:24
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CXL19880406

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-11-28 13:55:11
1.有可能枪头扎到孔了，跑的条带两头重；marker最后加样，先加了有可能会这样；琼脂胶搅拌不均匀，没凝好。这都有可能。
2.觉得有可能提的是基因组了，质粒没提出来啊……
3.这个真心不清楚啊。
另外，不知道是不是电压的原因，我是120V，20分钟搞定。祝实验成功～
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2楼2012-11-28 12:03:04
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