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three姚

银虫 (小有名气)

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专业: 污染生态学

[求助] 土壤微生物DNA提取不出来，是什么原因？已有3人参与

本人生态学专业，分子方面略懂皮毛。用上海生工的土壤DNA提取试剂盒从土样中提DNA，按照说明书操作，前后提了四次，0.8%琼脂糖凝胶电泳，什么都没跑出来。。。。。。借用师兄的Powersoil的试剂盒又提了一次，还是什么都没有。。。。。。土样是老师给的，经过研磨等前期处理，具体的我也不清楚，不知道会有什么影响。但不管怎么样，土壤中肯定有微生物，不应该什么都提不出来啊。。。实在想不出原因，只好请教各位，请大家帮我分析一下，是什么原因？

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思念是一棵没有年轮的树，永不老去

1楼 2012-11-24 20:01:05

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pangzio

铁虫 (小有名气)

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专业: 微生物生态学

【答案】应助回帖

第一、土壤样品是什么，有可能里面所含的微生物就很少，所以跑胶的时候，你是不会看见清晰条带的，提取完直接进行PCR，要设置阴性对照，看里面是否有微量的DNA；
第二、生工的盒子没有配除腐植酸的试剂，也许是腐植酸影响了；
第三、你提取的土壤若盐、碱的含量高的话，一般的试剂盒很难提出来，反而手配的试剂好提取点，当然买个质量好点的盒子一下可以解决以上的问题。

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