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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 土壤中微量ＤＮＡ的提取
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redx2011

银虫 (初入文坛)

[求助] 土壤中微量ＤＮＡ的提取

现在正在进行从土壤中微生物中提取ＤＮＡ，但是土样中我所需要的菌体很少，或者没有，求一种可以从土壤中提取微量ＤＮＡ的方法，并且可以用以后面的ＰＣＲ扩增。我开始从土壤中提取到了总ＤＮＡ，用的方法（ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法）损失比较大，而且腐殖酸的浓度偏高，而且只有稀释后才能进行　１６ｓ　ＰＣＲ扩增。
急求一种可以用的方法或者技术。
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大家一起努力
1楼 2013-04-08 23:31:19
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以试试用无菌水洗脱你的样品，然后用滤膜收集菌体，再提DNA扩增。
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處世樹為模，本固任從枝葉動；立身錢作樣，內方還要外邊圓。
2楼2013-04-09 00:38:09
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redx2011

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by WSW_Alone at 2013-04-09 00:38:09
你可以试试用无菌水洗脱你的样品，然后用滤膜收集菌体，再提DNA扩增。

是先将土壤制成悬液，然后用滤膜过滤么？
不可能在土给全部去除，到时候滤膜会被堵住？？
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大家一起努力
3楼2013-04-09 00:42:00
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liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有经费的话还是买试剂盒吧，国内的也有，OMEGA也有，效果都很好。
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转向地质微生物学
4楼2013-04-09 07:49:00
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Elainebear

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我用的是qiagen家的DNA提取试剂盒
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5楼2013-04-09 09:20:39
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xieweijing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试剂盒很不错，我最近在提，用的omega，加油
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好好加油，为自己，也为自己以后！
6楼2013-04-09 10:16:20
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用mobio 的 powersoil 吧，提取少量DNA 效果挺好。
实验室用这个提取 擦拭皮肤的棉签  都可以做PCR 的
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7楼2013-04-09 12:37:56
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wangzply

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
8楼2013-04-09 15:53:47
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by redx2011 at 2013-04-09 00:42:00
是先将土壤制成悬液，然后用滤膜过滤么？
不可能在土给全部去除，到时候滤膜会被堵住？？...

之前我们这边有做冰雪微生物的，他就是用滤膜，都是几升几升的过。土壤样品的话过滤膜我没试验过，你可以考虑试试看，多洗几次。

至于说用试剂盒的话，我们实验室用了MO BIO和OMEGA的，对于比较贫瘠的土壤我们的结果是OMEGA的好些，一般的土壤，MO BIO的好且快。
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處世樹為模，本固任從枝葉動；立身錢作樣，內方還要外邊圓。
9楼2013-04-09 16:55:21
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