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chenxiang29

银虫 (正式写手)

[求助] 表达已知序列,有必要做TA克隆吗

我想表达已知序列蛋白,有必要做TA克隆吗?可不可以直接连接到表达质粒上进行发酵表达呢?
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hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chenxiang29: 金币+10, ★★★很有帮助, 觉得这个不错呀 2012-11-01 17:21:40
可以不做TA克隆,直接连载体,但是无论是做TA克隆还是直接连载体,都要测序以保证序列的准确性。
我一般是直接克隆到表达载体然后转DH5α,送测序确定正确后再提质粒转表达宿主表达,这样做表达质粒在DH5α也能稳定保存。
7楼2012-11-01 11:58:28
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laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以,只是操作不好的话,连不上,没有质粒序列保存麻烦
但愿人长久
2楼2012-11-01 09:31:05
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szylnl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
TA克隆只是一个过程,它能保证你酶切时彻底,也可不做。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

用百分之百的努力去做每件事
3楼2012-11-01 09:32:25
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muyanshuang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有必要做TA克隆,进行序列测序,确定序列的正确性,确定没有任何突变。
有时候看似走弯路,实际上是在节省时间。
4楼2012-11-01 09:34:05
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